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INFORME DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
ESPECTROFOTOMETRÍA I : DETERMINACIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA DE MÁXIMA ABSORCIÓN Y DEL RANGO DE CONCENTRACIONES APROPIADO PARA QUE SE CUMPLA LA LEY DE BEER

I. INTRODUCCIÓN

Los métodos espectrofotométricos son uno de los métodos más utilizados en química cuantitativa para determinar la concentración de una sustancia en una solución. Se basan en laabsorción de luz visible o de otro tipo de energía radiante por una solución. Esta energía absorbida es proporcional a la concentración del material en la solución. El instrumento que se utiliza es el espectrofotómetro, que mide la capacidad de absorción que tienen algunas sustancias a diferentes concentraciones. La espectrofotometría se basa en la Ley de Lambert y Beer que muestra que existe unarelación lineal entre la absorbancia y la concentración de una solución; como en el caso del azul de metileno, se puede determinar a qué longitud de onda se logra la máxima absorción y poder establecer el rango adecuado de concentraciones en donde se cumpla la ley de Lambert y Beer.

II. REVISIÓN DE LITERATURA

La Espectrofotometría es un método analítico que utiliza los efectos de lainteracción de las radiaciones electromagnéticas con la materia (átomos y moléculas) para medir la absorción o transmisión de luz por las sustancias. Los aparatos de medida de absorción de la radiación electromagnética se denominan espectrofotómetros; en estos instrumentos se coloca un fototubo de solución en una ranura del colimador y luego se dirige la luz de una longitud de onda seleccionada a lasolución, el grado de absorción de luz dependerá del color de la solución y su intensidad, señala Alcazar (2002).
La determinación cuantitativa por espectrofotometría se basa en la Ley de Lambert y Beer, esta Ley expresa la relación entre absorbancia de luz monocromática  (de longitud de onda fija) y concentración de un cromóforo en solución:
A: Absorbancia o Densidad óptica
a:Absortividad
b: Longitud de paso o Recorrido de la Luz
c: Concentración


A = a x b x c

Ésta expresión muestra que existe una relación lineal de entre absorbancia y la concentración de una solución, siendo constante la longitud de trayecto óptico y la longitud de onda. Esta relación se cumple, y por lo tanto el análisis se puede aplicar, cuando:
* Todos los cuantos de energía tienen laposibilidad de ser absorbidos por la sustancia, es decir, la luz empleada debe ser monocromática y la de máxima absorción.
* Todas las moléculas de las sustancias deben tener la misma posibilidad de absorber los cuantos de energía, es decir, la sustancia debe estar lo suficiente diluida para que ninguna molécula quede oculta o a la sombra de otra. Se estima como promedio una concentración de 1 x10 -2 mol/L. Las concentraciones de las soluciones de trabajo deben reportar lecturas de porcentaje de transmitancia entre 20 y 60 %, a fin de minimizar la desviación por causa del error fotométrico recomienda Flashka (1981).
De no cumplirse los requisitos, se estaría produciendo desviaciones de la Ley de Beer, obteniéndose en consecuencia resultados erróneos o inexactos en la determinacióncuantitativa.
III. MATERIALES Y MÉTODOS
3.1. LUGAR DE EJECUCION
La práctica se llevó a cabo en el Laboratorio de Análisis Fisicoquímicos de la Universidad Nacional Agraria La Molina, la cual tuvo una duración de 2 horas aproximadamente.
Esta se llevó a cabo con toda normalidad, tomando en cuenta que un grupo previamente designado, estuvo a cargo de la preparación de las soluciones, asícomo del aprendizaje previo al uso del espectrofotómetro, los que serian utilizados el día de la práctica.
3.2. MATERIALES Y EQUIPOS:
* Azul de Metileno proporcionado por la UNALM
* Azul de Metileno
(PM= 319.86g/mol, Catálogo MERCK KGaA, 2007)
* Agua Destilada
* Papel Tissue
* Espectrofotómetro
* Cubetas
* Fiolas de 100 ml
* Fiola de 1000 ml
* Pipetas...