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Universidad Mariano Gálvez de Guatemala
Facultad de Ciencias Médicas y de la Salud
Laboratorio Bioquímica l
Licda. Nancy del Cid


















PRACTICA NO. 8
INTRODUCCIÓN A LA ESPECTROFOTOMETRÍA CURVAS DE CALIBRACIÓN


















Efraín Mendoza 200-11-530 Puesto # 28.
Stephanie Barillas 200-11-7610 Puesto # 29.
GabrielaDubón 200-12- 307 Puesto # 30.
Sección A
09/04/13













Índice


Pág.

Resumen…………………………………………………………….......... 1

Marco Teórico…………………………………………………………..… ´ 1

Datos Cálculos yResultados…………………………….……………………………......... 1

Discusión de Resultados………….……………………….……………………………… 2

Conclusiones………………………………………….……………………. 2

Anexos…………………………………….…………………………………. 2

Bibliografías…..…………………………………………………………….. 2
















Resumen

En el presente informe de laboratorio se detallan los datos obtenidos en la práctica de laboratorio acerca de qué es la espectrofotometría y las curvas de calibraciónpara su futuro uso en prácticas bioquímicas, se nos indicó previamente que la espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.Como objetivos en la práctica se tuvo que el estudiante pueda realizar la curva de calibración y que pudiera calcular la concentración desconocida a partir de una curva de calibración.

Marco Teórico

1) Absorbancia: Cantidad de intensidad de luz que absorbe la muestra.

2) Transmitancia: Cantidad de energía que atraviesa un cuerpo en determinada cantidad de tiempo.

3) Curva decalibración: Línea determinada por la información de respuesta de calibración de un instrumento.

4) Espectrofotómetro: Es un instrumento de medición que analiza el tipo de espectro que emite una fuente o que es absorbida por una sustancia que se encuentra en el camino de la luz que emite una fuente.

5) Rejillas de difracción: Son rejas que se utilizan para medir longitudes de onda y para estudiar laestructura e intensidad de las líneas espectrales.

6) Variable dependiente: es aquella cuyos valores dependen de los que tomen otra variable.

7) Variable independiente: Variable que puede cambiar libremente su valor, así como el primero, sin que su valor se vea afectado por alguna otra(s) variable(s).


Datos, Cálculos y Resultados

Tabla No. 1
Datos de la curva de calibración
TuboObservación
1 0.262
2 0.291
3 0.213
4 0.283
5 0.358
6 0.854
Fuente: Datos experimentales


Tabla No. 2
Datos de la curva de calibración muestra desconocida (tubo No. 5)
Observación
0.508
Fuente: Datos experimentales



Discusión de Resultados

Durante la practica se preparo la curva de calibración con la muestra madre que es Azul de Metileno, se tranfieririo 1 ml a cada balónaforado y después aforamos con distintos volúmenes para que se notara la concentración de la sustancia, por lo que la coloración del azul de metileno diluido con agua destilada fue disminuyendo, después de tener los tubos listos se procedió a utilizar el espectrofotómetro para leer la absorbancia de cada muestra. Para medir los valores de absorbancia y transmitancia de una disolución se utilizaun spectrofotómetró, la intensidad del haz de luz se va atenuando a medida que atraviesa la cubeta debido a la absorción de las moléculas de la muestra. El ritmo de absorción depende de la intensidad inicial de luz y de la concentración de moléculas.

Para llevar a cabo la etapa de calibración, se representa la absorbancia de las muestras de concentración...