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21-05-12
Laboratorio N# 5
TINCION DE GRAM
INTRODUCCIÓN:
En este laboratorio aprenderemos a distinguir las bacterias si son de un Gram positivo será azul y negativo será rojo. La tinción de Gramtiene muchas funciones como: esto ayuda a representar los cultivos, porque los morfotipos bacterianos que observamos en el Gram deben relacionarse con los aislamientos bacterianos que se realizan en elcultivo y, también sirve para reconocer la bacteria causante de una infección. La tinción de Gram le haremos uso en este laboratorio con diferentes tipos de cultivos provenientes de diferenteslugares.
OBJETIVO:
* Distinguir por medio de técnica “tinción de Gram” bacterias Gram positivas y Gram negativas.
MATERIALES:
* Microscopio
* Portaobjetos
* Cubreobjetos
* Asa desiembra
* Cubierta de tinción
* Cultivo bacteriano
* Pinzas
* Piedra
* Mechero de alcohol
* Cristol violeta/azul de metileno/violeta de genciana
* Lugol
* Alcohol
*Safranina
METODOLOGIA:
1. Recoger la muestra.
2. Hacer el extendido en espiral.
3. Dejar secar a temperatura ambiente.
4. Fijar la muestra con alcohol durante 1 minuto o al calor(flameando 3 veces aproximadamente).
5. Agregar azul violeta y esperar 1 minuto. Todas las células más u menos se tiñen de azul.
6. Enjuagar con agua.
7. Agregar lugol y esperar 1 minuto.
8.Enjuagar con agua.
9. Agregar alcohol y esperar 4 minutos (parte crítica de la coloración).
10. Enjuagar con agua.
11. Tinción de contraste agregando safranina y esperar 1-2 minutos. Estetinte dejara de color rosado las bacterias Gram negativas.
RESULTADOS:
INOCULACION DE BACTERIAS
1. Cuando ya tengamos el medio de cultivo preparado. Utilizamos un isotopo y lo pasamos de unamanera suave por el lugar en donde queremos obtener las bacterias.
2. Abrimos la caja Petri con el Agar y pasamos el isotopo con el que cogimos las bacterias en el cultivo de la misma manera que...
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