Análisis De Aguas Prepotables

Análisis de agua pretratada

A partir de una muestra de agua pretratada, se han realizado diferentes pruebas con el objetivo de determinar su aptitud para el consumo humano. Para ello, se ha dado uso de los distintos indicadores de contaminación fecal, bacterianos y víricos, que a continuación se indican:

1. Coliformes totales (CT):
Se han llevado a cabo dos métodos para la detección ycuantificación de los mismos:

a) El método del número más probable (NMP): es una técnica presuntiva, por lo que necesitaría ser respaldada por otra prueba confirmativa y, en caso de ser necesario, por una prueba completa.
Para la prueba presuntiva se han utilizado tres seriales de tres tubos de agar McConkey con campana Durham en los que se han incubado 0.1, 1 y 10mL de agua pretratada a 35ºCdurante 48 horas.

b) Filtración por membrana (FM): este método, de tipo confirmativo, consiste en el filtrado de distintos volúmenes (en este caso, 1, 10 y 50 mL) de la muestra de agua a analizar a través de membranas de nitrocelulosa de 0.40 µm, con ayuda de una bomba de vacío. Dichas membranas son incubadas en medio m-Endo. Este medio es selectivo, contiene lactosa como sustrato, que cuando esfermentada se producen aldehídos que van a reaccionar con la fucsina presente en el medio. Como resultado, se forma una base de Schiff que aplica un color verdoso metálico a la colonia.

Resultados:
-NMP: algunos tubos adquirieron un color anaranjado y presentaban burbujas de gas, pero no llegaron a virar el color de forma evidente, por lo que se calificaron como negativos, resultado opuestoal obtenido en el test de Colilert.
-FM: los resultados obtenidos fueron 23-65-105 en las muestras de 1, 10 y 50 mL respectivamente. El título correspondiente calculado sería:
[(23ufc/1mL)+(65ufc/10mL)+
(105ufc/50mL]/3= 10.53 ufc/mL
Esto indica que el método NMP no ha sido concluyente y puede deberse a que los coliformes no hayan crecido adecuadamente por algún motivo.
2. Coliformes fecales(CF):

Esta prueba es de tipo confirmativa. Se ha realizado mediante el método de filtración por membrana, de nuevo con distintos volúmenes de la muestra del agua a analizar (1, 10 y 50 mL) y se incubaron en medio m-FC, con azul de anilina a 44.5ºC durante 48 horas. Este tets permite distinguir los coliformes totales de E.coli. El sustrato o fuente de carbono es la lactosa, que al sermetabolizada por los coliformes fecales, las colonias adquieren un color azul intenso.
Resultados:
Se obtuvieron 4-1-0 en las correspondientes diluciones, lo que confirma la presencia de coliformes en la muestra, por lo que el título correspondiente sería:
[(4ufc/1mL)+(1ufc/10mL)]/2= 2.05 ufc/mL


3. Enterococos fecales

Para la estreptometría se han realizado dos test:
a) Un serial de tubosmúltiples con los mismos volúmenes que los empleados en colimetría, usando un caldo Rothe e incubando posteriormente durante 48h a 36ºC.
b) Filtración por membrana. Este método es idéntico al ejecutado en colimetría, haciendo pasar a través de membranas de nitrocelulosa de 0.40µm, 1, 10 y 50mL de la muestra tomada de agua a analizar, para, posteriormente, ser incubados durante 48 horas en medioagar m-Enterococcus. Este medio resulta selectivo al contener azida sódica, que inhibe el crecimiento de los Gram negativos que puedan estar presentes en la muestra. 
Resultados:
Tras realizar estos test no se observó turbidez en los tubos incubados, sin embargo se observaron 2-10-54 colonias en las respectivas diluciones, por lo que el título resultante es de:[(2ufc/1mL)+(10ufc/10mL)+(54ufc/50mL)]/3=4.08 ufc/mL

4. Clostridium

Para la detección de clostridios sulfitoreductores se llevó a cabo el método de filtración en membrana, haciendo pasar con ayuda de una bomba de vacío, un volumen de 20 ml. Posteriormente, se incubó la membrana a 42ºC durante 48 horas en medio m-CP en condiciones anaeróbicas (usando la campana de gases, con ayuda de un sobre de hidrógeno).
Tras la...