Analisis Bioquimica Enzimas

RESULTADOS: Datos obtenidos:
Tabla 1: efecto de la concentración de la enzima en la absorbancia
TUBO
TIEMPO
A 1/200
A 1/500
1
0
0,088
0,080
2
5
0,224
0,213
3
10
0,344
0,277
4
15
0,409
0,306
5
200,481
0,370
6
25
0,470
0,398
7
30
0,555
0,408
8
35
0,539
0,414
9
40
0,531
0,455
Tabla 2: efecto de la concentración de sustrato en la absorbancia
TUBO
TIEMPO
A 0,1mM
A 1mM
1
0
0,210
0,178
2
5
0,8620,602
3
10
0,983
0,639
4
15
0,617
0,764
5
20
0,610
1,062
6
25
0,596
1,050
7
30
0,645
1,161
8
35
0,732
1,206
Tabla 3: efecto de la temperatura en la absorbancia
TUBO
TIEMPO
A 4ºC [1mM]
A 50ºC [1mM]
1
00,199
0,178
2
5
0,267
0,602
3
10
0,347
0,639
4
15
0,435
0,764
5
20
0,446
1,062
6
25
0,469
1,050
7
30
0,514
1,161
8
35
0,467
1,206

Curva de calibración:
MUESTRA
A
[CONCNETRACION]
1
0
0
2
0,05
5
3
0,110
4
0,3
30
5
0,5
50
6
0,7
70
7
1
100
NOTA: las graficas respectivas se encuentran en el documento de Excel.
ANALISIS:
De acuerdo con lo observado en las graficas respectivas y al hacer lainterpolación de los datos resaltados a la curva de calibración se obtuvieron las siguientes concentraciones:
Concentración de enzima 1/500: concentración de producto 40
Concentración de enzima 1/200:concentración de producto 55
Concentración de sustrato 1mM: concentración de producto 65
Concentración de sustrato 0,1 mM: concentración de producto 99
Temperatura a 4ºC: concentración de producto 51,6
Reacciónenzimática de la fosfatasa ácida con el sustrato utilizado:


Se obtiene la curva de calibrado midiendo la absorbancia de una serie de soluciones de concentraciones conocidas de una misma sustanciatratadas con un mismo método y medidas a igual longitud de onda en el mismo instrumento, a la vez se determina su concentración.

Como se observa claramente, la recta obtenida presenta una parte lineallo cual permite obtener el intervalo de Concentraciones óptimo o el intervalo que presentara una relación lineal entre absorbancia y concentración. Absorbancia en función de la concentración, que...