Anticuerpos camélidos

1142. PRODUCCIóN DE ANTICUERPOS RECOMBINANTES DE LLAMA PARA EL DESARROLLO DE INHIBIDORES ENZIMáTICOS ESPECíFICOS URRUTIA MARIELA, ZAREBSKI Laura, VILA MELO Guillermo, GOLDBAUM Fernando
Fundación Instituto Leloir

Los camélidos (camellos, llamas, etc.) tienen una característica muy particular en cuanto a sus inmunoglobulinas. Una fracción importante de sus anticuerpos de isotipo IgG carecen decadena liviana y del dominio CH1 de la cadena pesada. Esto hace que el sitio de combinación de estos anticuerpos este formado por una sola región variable (VHH). Estos anticuerpos desarrollan una estrategia de binding muy particular, basada en la presencia de CDR3s (complementary determining region 3) muy largos, los cuales son capaces de penetrar en las concavidades de las proteínas quereconocen. Por ello se ha postulado el uso de estos anticuerpos para la inhibición específica de enzimas.
Planeamos producir y caracterizar anticuerpos de camélidos específicos contra diversas proteínas. Como primer etapa utilizamos como inmunógeno modelo la enzima recombinante lumazina sintetasa de Brucella abortus. Se inmunizaron llamas y a partir de sangre periférica de dichos animales se purificaroncélulas sanguíneas periféricas. Mediante transcripción reversa y PCR con oligonucleotidos degenerados se levantaron los genes VHH, los cuales fueron introducidos en un vector para display en fagos. Así obtuvimos una biblioteca de 2x106 clones independientes, los cuales fueron enfrentados al antígeno y seleccionados por su capacidad de unirse al mismo. Los resultados del panning y la selección,junto con la caracterización de los clones positivos serán discutidos.

1142. PRODUCCIóN DE ANTICUERPOS RECOMBINANTES DE LLAMA PARA EL DESARROLLO DE INHIBIDORES ENZIMáTICOS ESPECíFICOS URRUTIA MARIELA, ZAREBSKI Laura, VILA MELO Guillermo, GOLDBAUM Fernando
Fundación Instituto Leloir

Los camélidos (camellos, llamas, etc.) tienen una característica muy particular en cuanto a susinmunoglobulinas. Una fracción importante de sus anticuerpos de isotipo IgG carecen de cadena liviana y del dominio CH1 de la cadena pesada. Esto hace que el sitio de combinación de estos anticuerpos este formado por una sola región variable (VHH). Estos anticuerpos desarrollan una estrategia de binding muy particular, basada en la presencia de CDR3s (complementary determining region 3) muy largos, los cualesson capaces de penetrar en las concavidades de las proteínas que reconocen. Por ello se ha postulado el uso de estos anticuerpos para la inhibición específica de enzimas.
Planeamos producir y caracterizar anticuerpos de camélidos específicos contra diversas proteínas. Como primer etapa utilizamos como inmunógeno modelo la enzima recombinante lumazina sintetasa de Brucella abortus. Se inmunizaronllamas y a partir de sangre periférica de dichos animales se purificaron células sanguíneas periféricas. Mediante transcripción reversa y PCR con oligonucleotidos degenerados se levantaron los genes VHH, los cuales fueron introducidos en un vector para display en fagos. Así obtuvimos una biblioteca de 2x106 clones independientes, los cuales fueron enfrentados al antígeno y seleccionados por sucapacidad de unirse al mismo. Los resultados del panning y la selección, junto con la caracterización de los clones positivos serán discutidos.

1142. PRODUCCIóN DE ANTICUERPOS RECOMBINANTES DE LLAMA PARA EL DESARROLLO DE INHIBIDORES ENZIMáTICOS ESPECíFICOS URRUTIA MARIELA, ZAREBSKI Laura, VILA MELO Guillermo, GOLDBAUM Fernando
Fundación Instituto Leloir

Los camélidos (camellos, llamas, etc.)tienen una característica muy particular en cuanto a sus inmunoglobulinas. Una fracción importante de sus anticuerpos de isotipo IgG carecen de cadena liviana y del dominio CH1 de la cadena pesada. Esto hace que el sitio de combinación de estos anticuerpos este formado por una sola región variable (VHH). Estos anticuerpos desarrollan una estrategia de binding muy particular, basada en la...