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Practica # 2:
EFECTO DE pH Y TEMPERATURA SOBRE LA ACTIVIDAD DE LA ENZIMA AMILASA SALIVAL

Integrantes:
Gimena Jara
Stefani Leon
María Percca


Profesora:
Livia Santivañez









OBJETIVOS
Evaluar el efecto del pH sobre la hidrólisis del almidón por la amilasa salival.
Evaluar el efecto de la temperatura sobre la hidrólisis del almidón por la amilasa salival.RESULTADOS
1. EFECTO DEL PH
Reactivos
Control 1
Tubo 1
Control 2
Tubo 2
Control 3
Tubo 3
Almidón
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
Incubar a 37° por 5 min.
Agua
0.3 ml
0.1 ml
0.2 ml
-
0.2 ml
-
HCl 0.2N
-
-
0.1 ml
0.1 ml
-
-
NaOH 0.15N
-
-
-
-
0.1 ml
0.1 ml
Saliva diluida 1:20
-
0.2 ml
-
0.2 ml
-
0.2 ml
Incubar a 37° por 5 min.
HCl 0.02N
1.0 ml
1.0ml
1.0 ml
1.0 ml
1.0 ml
1.0 ml
Reactivo de Yodo
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml
0.5 ml

2. EFECTO DE LA TEMPERATURA


















CUESTIONARIO:
1._ Explique brevemente el fundamento teorico de la técnica de yodo para la determinación de almidon. Indique que evento debe darse para que produzca el cambio de color.
La prueba del yodo es una reacciónquímica usada para determinar la presencia o alteración de almidón u otros polisacáridos. Una solución de yodo  disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio reacciona con almidón produciendo un color púrpura. Esta prueba puede realizarse con cualquier producto que contenga almidón como ser papa, pan o determinados frutos.
Este evento se da por el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro apartir de la reacción del almidón con el yodo presente en la solución de un reactivo llamado Lugol. La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro.
2. Si el pH óptimo de la enzima es 6.5, y es sometida a un ph de 10 ¿Que cree usted que sucederá con la enzima?
El pH óptimo es el pH más adecuado parala actividad catalítica. La mayoría de los enzimas son muy sensibles a cambios de pH, y esta desviación puede afectar su actividad. Lo que sucedería con la enzima es que al haber una variación de pH a 10, generaría que la velocidad de la reacción de la enzima disminuya. También ocasionaría que el sitio activo no impida la formación entre sustrato y enzima.
3. Usted coloca un tubo 0.5 ml desolución de almidón, o.5 de saliva no diluida o lleva a incubar a 37 °C por 20mn, transcurrido el tiempo adiciona 0.5 ml de reactivo de yodo, obteniendo una solución de color Azul.


No, porque tras haber realizado el experimento en clase, se concluyó que la temperatura óptima de la amilasa salival era 37°C. En el experimento mencionado en la pregunta también se está utilizando la misma temperaturay además no menciona ningún cambio de pH, por lo tanto, sí debería hidrolizar al almidón, sin embargo, al resultar una solución azul nos está diciendo lo contrario.


4. Si una enzima ha sido expuesta por 10mn a una temperatura de 100°C , y luego es colocada en un tubo de reacción a temperatura óptima. ¿Cree usted que presentaría actividad enzimáticamente a esta segunda temperatura? Si o No¿Porque?
No, porque al haber un aumento de la temperatura óptima, el aumento de la velocidad de la reacción es contrarrestado por la pérdida de la actividad catalítica debido a la desnaturalización de la enzima y la actividad enzimática decrece rápidamente. No habría una actividad enzimática, y esto se puede comprobar al ver el tubo de reacción, donde la solución debe ser de color Azul.
5.-Si unaenzima ha sido incubada por 10 minutos a una temperatura de a 4°C y luego es colocada en un tubo de reacción a la temperatura optima, ¿cree usted que presentara actividad enzimática a esta segunda temperatura? ¿Por qué?
Sí, porque al disminuir la temperatura, la velocidad disminuye y por lo tanto la actividad enzimática también disminuye, pero no llega a desnaturalizarse, ya que se hidroliza...