Bacteriologia
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CULTIVO DE EXUDADO FARINGEO
MATERIAL: 1. Hisopos estériles 2. Abatelenguas 3. Caldo Todd Hewitt 4. Placas de Agar Gelosa Sangre 5. Placas de Agar Sal y Manitol 6. Placas de Agar Biggy 7. Placas de Agar gelosa Chocolate con Polienriquecimiento 8. Discos de bacitracina de 0.04 U 9. Cepas de referencia de Estreptococos grupo A y B, y Staphylococcus aureus 10.Material propio del laboratorio de Microbiología TOMA DE LA MUESTRA: 1. Humedecer un hisopo estéril en el tubo con Caldo de Todd Hewitt (exprimir en la pared del tubo) 2. Indicar al paciente que respire profundo y que emita un “aah” esto ayuda a elevar la úvula y reducir el reflejo de la nausea. 3. Dirigir rápidamente el hisopo en los pilares tonsilares por detrás de la úvula en la faringe posterior,evitando la contaminación oro faríngea. TRANSPORTE 1. Si la muestra se cultiva de inmediato colocar en un tubo con Caldo de Todd Hewitt 2. Cuando la muestra no se cultiva dentro de las primeras 2 horas colocar en medio de transporte de Stuart o Cary Blair
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AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN: 1. Incubar las muestras en el medio de Todd Hewitt 3 h a 35°C 2. Resembrar en Placas de Agar Gelosa Sangrepor estría cruzada y picadura sobre las estrías y Agar de Sal y Manitol. Incubar 18 – 24 h a 35°C 3. Efectuar lectura a contra luz de las placas, las colonias de estreptococo son pequeñas de 1 mm de diámetro, convexas, translucidas, grisáceas rodeadas por una zona de hemólisis beta, debido a la destrucción total de los eritrocitos presentes en el medio PRUEBA DE LA CATALASA : para detectar laproducción de la enzima catalasa H2O2 2H2O + O2
En presencia de la enzima, el peróxido forma burbujas Reactivo: Peróxido de hidrógeno al 3 % Mantener en refrigeración de 2 a 8°C Debido a la actividad de la catalasa contenida en los eritrocitos, se recomienda que la prueba se realice a partir de un cultivo en medios libres de sangre. La prueba se pude realizar sobre el crecimiento en placa o en tubode gelosa, con una suspensión fina en tubo o en portaobjetos. Prueba en portaobjetos A partir de Agar de Soya y Tripticaseína, tomar con asa o palillo de madera estéril una colonia y depositarla sobre un portaobjeto limpio y seco, inmediatamente agregar 1 gota de peróxido de hidrógeno al 3 % sobre la parte en que se depositó la colonia. Observar la formación de burbujas de gas en la prueba...
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