bilirubiunas

Bilirubinas


NTRODUCCION

La bilirrubina que es el resultado de la degradación de la hemoglobina en los glóbulos rojos es elresultado de la hemólisis (destrucción de los eritrocitos). Esproducida por el sistema retículoendotelialy es eliminado por el hígado, que la excreta hacia la bilis. Es la sustancia que pigmenta la bilis. En elsuero existe normalmente una pequeña cantidad debilirrubina que se eleva cuando produce unadestrucción excesiva de eritrocitos o cuando el hígado no logra excretar las cantidades suficientes de bilirrubina producida.


Objetivo
Determinar los valoresde bilirrubina total, directa e indirecta en el suero sanguineo. Asi como tambien saber diferenciar los tipos de bilirrubina según su solubidad y mediante la reaccion de diazotacion


FUNDAMENTOLa bilirrubina directa presente en la muestra reacciona con el ácido sulfanílico diazoado, originando un complejo
coloreado que puede determinarse espectrofotométricamente. La cetrimida solubiliza labilirrubina indirecta
permitiendo su reacción junto con la fracción directa1,2. Los términos “directa” y “total” se refieren a las características
de reacción en presencia o ausencia desolubilizantes (aceleradores). La bilirrubina “directa” e “ indirecta” equivale
sólo de forma aproximada a las fracciones conjugada y no conjugada.




Material

Baño maria a 37ºC.
Pipetas de vidrioPipeta automática
Tubos de ensayo de vidrio.
Cronómetro.










PROCEDIMIENTO
MUESTRAS
Suero recogido mediante procedimientos estándar.
La bilirrubina en suero es estable 2días a 2-8º C si se protege de la luz.









PROCEDIMIENTO PARA BILIRRUBINA TOTAL

1. Pipetear en tubos de ensayo:
Blanco Reactivo Blanco Muestra Muestra Patrón
Agua destilada 100 μL -Muestra - 100 μL 100 μL -
Patrón (S) - - 100 μL
Reactivo (AT) - 1,0 mL - Reactivo de Trabajo 1,0 mL - 1,0 mL 1,0 mL
2. Agitar bien y dejar durante 2 minutos a temperatura ambiente.
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