BIOFILMS DE LISTERIA MONOCYTOGENES

LA UBICACIÓN DE LISTERIA MONOCYTOGENES EN LOS BIOFILMS
MIXTOS CON PSEUDOMONAS FLUORESCENS LE PROTEGE DE LA
ACCIÓN DE LOS BIOCIDAS
Carmen H. Puga (chpuga@pdi.ucm.es), Laura M. Hernández, Sandra Muñoz,Silvia García, Liliana Angamarca. Tutores: Orgaz, B., y San José, C.
Dpto. de Nutrición, Bromatología y Tecnología de los Alimentos. Facultad de Veterinaria. Universidad Complutense de Madrid.Listeria monocytogenes (Lm) es probablemente el patógeno vehiculado por alimentos
más vigilado por la legislación del sector. Hay pues gran interés en conocer las
peculiaridades de su resistencia a lascondiciones de preservación de alimentos y a los
procedimientos de limpieza y desinfección de las plantas de procesado. La proliferación
de bacterias en biofilms (BF), esto es en comunidades celularesembebidas en
sustancias extracelulares (EPS) que se adhieren a superficies abióticas, constituye una

CEPAS BACTERIANAS
─ L. monocytogenes (Lm) Scott A
─ 4 Cepas persistentes de Lm
─ P. fluorescensATCCTM 948® (Pf)
─ Inóculo inicial: 104 UFC·mL-1

de las principales formas de resistencia (Flemming y Wingender, 2010). Es un hecho
conocido que Lm por sí sola puede formar BF, pero esta capacidadaumenta en
presencia de bacterias buenas formadoras de EPS y abundantes en alimentos, como las
Pseudomonas. También es sabido que Lm en BF mixtos aumenta su resistencia a
biocidas (Simoes, 2009). Este grupode investigación ha observado mediante
microscopía confocal que en los BF mixtos con Pseudomonas fluorescens (Pf) y en
particular en los obtenidos a temperaturas de refrigeración, Lm se acabalocalizando en
las capas más profundas.

A L. monocytogenes Scott A + Pf

ANÁLISIS
─ Células adheridas: UFC· cm-2
─ Biomasa adherida (Células + EPS):
DO Coomassie
─ Microscopía Laser de Confocal:
ViaGramTMRed+Bacterial Gram
Stain and Viability kit
Imaris 7.6, measurement Pro

B Cepas persistentes L. monocytogenes + Pf

48h

─ Tryptone Soy Broth (TSB)
─ Hasta 96 horas a 20º C
─ Hasta 20 días a 4º C
─...