Biol De Reproduccipn

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Practica No. 5 Capacitación espermática.
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Universidad Autónoma de Ciudad Juárez


Introducción
La capacitación espermática es un proceso que ocurre de forma natural en los espermatozoides, les permite tener la capacidad de fecundar el óvulo. Al expulsar en la eyaculación el espermatozoide noes capaz de penetrar la gruesa membrana del óvulo, necesita que ocurran una serie de cambios en su estructura que se producen a lo largo del tracto reproductivo femenino. (1)
En los tratamientos de reproducción asistida que requieren este proceso como inseminación artificial y FIV, la capacitación se puede realizar en el laboratorio.
También se debe utilizar para efectuar un diagnóstico; eneste caso la capacitación espermática es una prueba que se realiza al semen con la finalidad de valorar la capacidad de los espermatozoides para fecundar el óvulo.
Para realizar la capacitación espermática se procesa la muestra de semen mediante técnicas de laboratorio como son el swim-up o los gradientes de densidad. 1
Los espermatozoides se separan del líquido seminal. A su vez, éstos se agrupanen función de su movilidad y morfología

obteniéndose finalmente los espermatozoides aptos para llevar a cabo la fecundación del óvulo.
Los resultados se expresan como cantidad de espermatozoides móviles y con trayectorias rectilíneas por mililitro de semen eyaculado. Es lo que se conoce como REM (recuento de espermatozoides móviles).
El conocimiento actual de muchos de los cambios queexperimenta el espermatozoide durante la capacitación, proviene de estudios “in vitro”. Actualmente, se piensa que las principales fases que atraviesa el espermatozoide durante la capacitación son los siguientes:
-Adquisición por parte del espermatozoide de un aumento de la permeabilidad de calcio.
-Modificación de la estructura de la membrana.
-Activación de la adenil ciclasa.
-Conversión deproacrosina en acrosina activa. (2)

Objetivo
Conocer como se debe realizar una capacitación espermática en un proceso de fecundación in vitro, a partir de la valoración de espermatozoides con diferentes parámetros, como lo es la motilidad, concentración y volumen.

Métodos
Material y soluciones:
* Banco de semen de bovino
* Muestra de semen de humano
* Microscopio
* Micropipietas* Cubreobjetos y portaobjetos
* Bata
* Guantes
* Cubreboca
* Jeringas
* Tubos eppendorf
* Solución de Lower
* Solución de UPPER
* Sperm wahing

Procedimientos:
Banco de semen de Bovino
1. Se descongelo el banco de semen de Bovino durante 15 min a temperatura ambiente.
2. Se tomo una muestra y se analizo en el microscopio determinando si estababien capacitado o no.
3. Posteriormente se colocaron muestras del banco de semen de Bovino en 4 tubos, 2 tubos con espermatozoide con buena calidad de capacitación y los otros 2 tubos con mala calidad de capacitación.
4. En dos tubos uno con buen y otro con mala calidad de capacitación, se realizo la técnica de Swim up, que consiste en capacitar a los espermatozoides colocando 1 ml desolución de sperm washing o de lavado.
5. En los otros dos tubos uno con buena y otro con mala calidad de capacitación, se coloco solución de HTF.
6. Se centrifugaron los 4 tubos a ¿?? , a un temperatura de 37°C durante 15 minutos.
7. Se tiro el sobrenadante, y se analizaron las muestras en el microscopio, haciendo un análisis de Antes-Después.

Muestra de semen de humano
1. Se realizóun análisis de muestra de semen en el microscopio, cuantificando su motilidad, volumen y concentración, determinando si su capacitación era de calidad: buena/media/mala.
2. Una vez determinando la calidad de capacitación, se escogió el método de capacitación:
-Buena calidad: Técnica de filtración por gradiente, colocando en un tubo 0.5 ml de Lower, 0.5 ml de UPPER y 1 ml de semen,...