BIOLOGIA



Cromatografía de filtración en gel
¿Cuál es la 1er molécula que eluye 1ro en cromatografía de filtración en gel y porque?
La cromatografía de filtración en gel es una técnica que permiteseparar moléculas en función de su tamaño molecular. La capacidad separadora reside fundamentalmente en el gel cuya matriz consta de un gran número de esferas porosas microscópicas. Cada gel secaracteriza por un rango de fraccionamiento que depende del tamaño de sus poros.
La purificación de una sustancia de interés se hace siguiendo los criterios de separación basados en alguna propiedad física oquímica que diferencia al compuesto en cuestión de otros que en principio estarían ligados a él.

Entre los diversos criterios de separación cabe citar:
Aquellos que fraccionan las moléculasbasándose en sus tamaños, como la cromatografía de filtración en gel y la ultracentrifugación.
Los que separan las moléculas atendiendo a las diferencias en la carga eléctrica neta del compuesto, comola cromatografía de intercambio iónico y la electroforesis.
Los que se basan en la retención específica de sólo uno o varios tipos de moléculas, entre los que cabe destacar la cromatografía deafinidad.
Procedimientos de separación basados en diferencias de solubilidad.
Métodos basados en la adsorción diferencial a determinadas matrices.

La cromatografía de filtración en gel, máscorrientemente llamada de exclusión molecular, es una técnica de purificación muy extendida y apreciada debido a su sencillez y eficacia en la resolución de mezclas complejas de macromoléculas.
Cuando sehace pasar una mezcla de moléculas de distinto tamaño, a través de una columna de filtración en gel; aquellas moléculas con un tamaño mayor que el diámetro de los poros de las partículas, sólo podránmoverse en su camino, a través de la fase estacionaria, en el espacio que queda entre las partículas; y por lo tanto, no se verán retrasadas en su descenso. En cambio aquellas moléculas capaces...