Biologia



Identificación de carbohidratos, lípidos y proteínas.


























Materiales

Equipo y materiales necesarios para la realización del Laboratorio

• Microscopio compuesto
• Porta y cubre-objetos
• 8 tubos de ensayo, resistentes al calor
• 8 pipetas de 2 a 5 ml o goteros
• Gradilla para tubos de ensayo
• Una hoja de afeitar nueva
•Solución de Lugol
• Solución de Sudán III o IV
• Solución de Benedict u otra para reconocimiento de H de C
• Solución de Glucosa al 1%
• Solución de Sacarosa al 1 %
• Solución de Almidón al 1% • Una papa
• Un trozo pequeño de grasa animal
• Aceite de cocina
• Agua destilada
• Pinzas
• Trípode
• Vasos de precipitados

Procedimientos:

Observación Macroscópica

1)Identificación de polisacáridos mediante la prueba de Lugol e identificación de azucares mediante la prueba de Benedict:
- Se enumeró del 1 al 6, 6 tubos de ensayos.
Al tubo número 1 y 2 se le agrego 1 ml de almidón, posteriormente a los tubos 3 y 4 se les agrego 1 ml de sacarosa, y a los tubos finales 5 y 6 se les agrego 1 ml de glucosa. Luego a los tubos 1, 3 y 5 se les incorporo 1 gota de solución deLugol.
Posteriormente a los tubos 2,4 y 6 se les incorporo 10 gotas de solución de Benedict y se les coloco en baño María durante un lapso de 3 minutos, y usando un mechero de alcohol se les llevo al punto de ebullición.

2) Identificación de Lípidos:
- Se dispuso de un tubo de ensayo con 1 ml de aceite de cocina y 1 ml de agua destilada al cual se le introdujo en su interior gotas de Sudán elque fue revuelto con todo en su interior, al término de la agitación fue dejado en la gradilla y luego de 5 minutos se observó para detectar eventuales cambios.

Observación Microscópica
a. Gránulos de Almidón
Se realizó con una hoja de afeitar un corte muy fino del tubérculo de una papa. Al finalizar este corte se preparó una solución utilizando Lugol diluido como un medio de montaje y alestar lista se observó utilizando el objetivo 40x, para posteriormente rotularlo.
b. Observación de Tejido adiposo
Con una hoja de afeitar se obtuvo un corte delgado de grasa animal, está muestra se montó en el porta espejos y se le agrego Sudán III. Se colocó el cubre objetos y se puso sobre la platina del microscopio. Se utilizó un Aumento de 10 x y luego un aumento de 40 x para luego rotularlas.3) Identificación de Proteínas
Se requirió:
- 2 tubos de ensayo
- Solución de albúmina 0,5%
- Solución de almidón 0,5%

A) Prueba con Biuret
- En el tubo 1 se dispensó 2 ml de una solución de albumina y en el tubo 2 se dispensó 2 ml de solución de almidón. A cada tubo se le termino por agregar 1 ml de reactivo Biuret y se observó en cual tubo tomó la tonalidad final de color violetao purpura.

B) Desnaturalización de Proteínas

I. Efecto de la temperatura
- Se colocó en un tubo de ensayo 2 ml de una solución de albúmina el cual fue calentado y agitado por y entre la flama del mechero.
Se anotaron los cambios y su respectiva explicación.

II. Efecto del PH
- En un tubo de ensayo se introdujo una solución de albúmina a la cual se le dejo escurrir por las paredes deltubo una solución de 1ml de ácido nítrico H2NO3.
En otro tubo dispuesto para la experimentación se le introdujo 2 ml de albúmina y se le dejo escurrir por las paredes del tubo 2 ml de Hidróxido de Sodio NaOH.
Se observaron y registraron los cambios.

Resultados

Observación Macroscópica

1) Identificación de polisacáridos

Tabla Identificación de almidón
TUBO
PRUEBA DE BENEDICTPRUEBA DE LUGOL

Color Inicial
Color Final
Color Inicial
Color Final
Reacción
1. Almidón


Transparente denso
Mostaza denso
Negativa
2. Almidón





3. Sacarosa


Transparente
Amarillo
Negativa
4. Sacarosa





5. Glucosa


Muy transparente
Amarillo
Negativa
6. Glucosa





Se aplicó una gota de lugol a los tubos 1, 3 y 5, se observó la variación de...