Bioquim

Páginas: 4 (897 palabras) Publicado: 19 de agosto de 2013


Practica 4
Identificación y cuantificación de proteínas y curva de calibración.

Objetivo
Identificar proteínas por la presencia de enlaces peptidicos y grupos aromaticos, así comocuantificarla mediante la técnica de Biuret.

Introducción
Es bien sabido que la unión de diversos aminoácidos dan como resultado la composición de una proteína. Una proteína se presenta en diversasestructuras, según su nivel de complejidad; las cuales se denominan primarias, secundarias, terciarias y cuaternarias y son especificas en cada caso.

En esta práctica se pretende explicar el desarrollo dediversas técnicas para la identificación de proteínas en una sustancia. Dichos procesos son: Técnica de ninhidrína, xantoproteica y biuret. Esta ultima será empleada para la práctica de la curva decalibración.

Prerrequisitos
PEPTIDOS: Polímero de aminoácido formado por menos de 50 residuos.
POLIPEPTIDO: Polímero de aminoácido formado por mas de 50 residuos.
PROTEÍNAS: Macromolécula formadapor uno o más polipéptidos.
CLASIFICACIÓN DE PROTEÍNAS: Por su forma (globulares y fibrosas), por su composición (simples y conjugadas) y por su valor nutricional (completas e incompletas)
NIVELESDE COMPLEJIDAD ESTRUCTURAL DE LAS PROTEÍNAS: Primaria (Aminoácidos unidos en disposición lineal), secundarias (Formación de hélices alfa y láminas beta), terciarias (estructura tridimensional) ycuaternaria (estructura tridimensional formada por la unión de estructuras terciarias).
REACCIONES ANALOGAS A XANTOPROTEICA: Biuret: Reactivo azul que ante la presencia de proteínas se torna enmorado/violeta, pero en presencia de polipéptidos de cadena corta. Bradford: Se basa en la unión de un colorante azul-naranja a una proteína para formar el complejo colorante-proteína.
REACCIONES PARACUANTIFICAR PROTEÍNAS: Biuret y Método de BCA (Ácido bicinconínico)
MÉTODO DE SANGER: Determina cuantitativamente grupos amino terminales, utiliza como reactivo el dinitrofluorobenceno, formándose...
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