bioquimica

I. INTRODUCCION


La realización de extensiones y tinciones es práctica habitual en el laboratorio. Pese a no realizarse a todas las muestras, al no ser considerado procedimiento de rutina, es necesario en aquellos casos en los que se detecte mediante análisis previos alguna alteración.
La correcta realización, así como una buena interpretación de lo observado, permite en muchos casos eldiagnóstico de hematopatías.
Las tinciones hematológicas son un conjunto de procesos que conducen a la coloración de las estructuras que componen las células sanguíneas. Esto tiene por objeto el aumentar el contraste entre esas estructuras y el medio que las rodea, y permite por tanto que las células sean visualizadas microscópicamente con mayor facilidad.
Los colorantes más utilizados para latinción hematológica se basan en la coloración de Romanowsky, constitutido fundamentalmente por una mezcla de Eosina y azul de metileno.
La naturaleza acida o básica de las estructuras celulares determina su avidez por los componentes del colorante.

II. MARCO TEORICO

Colorantes hematológicos
¿Qué es un colorante?
Un colorante es una sustancia con capacidad de transmitir un color a unsustrato. Debe penetrar e interactuar con las estructuras moleculares de las células.
Las estructuras celulares que se van a teñir deben ser tratadas previamente, mediante la fijación. La fijación es un proceso fisicoquímico que inmoviliza determinadas estructuras celulares, y que permite que puedan ser posteriormente coloreadas sin ser arrastradas en el proceso.
Durante la fijación se producevarios fenómenos:
Se “coagulan” las proteínas celulares conservando su arquitectura.
Pueden perderse algunas sustancias no esenciales para la interpretación citomorfológica; los alcoholes disuelven las grasas.
Las extensiones sanguíneas se pueden fijar con calor seco, alcoholes, formaldehido, acetona, etc. El mejor fijador para morfología es el metanol (alcohol metílico).

Contenido celularNúcleo: Contiene ADN y proteínas especificas.
Su mayor o menor densidad, equivalente a más o menos madurez, se traduce por una coloración +/- intensa.
La presencia de nucléolos (acumulación de ARN propia de células inmaduras) se ve como una zona clara rodeada de un halo más intenso.

Retículo endoplasmico rugoso:
Es el lugar donde se sintetizan las proteínas de las células.
Es muyrico en ARN (ribosomas) cuyo carácter acido atrae a los colorantes básicos a veces muestra dilataciones que al microscopio parecen pequeñas vacuolas.

Estructuras granulares
Mitocondrias
Lisosomas
Centriolos
Gránulos de glucógeno
Vacuolas
Otras
Se observan con el microscopio óptico como gránulos, más o menos grandes, que adquieren distinta coloración según su contenido.
¿Cómotransmite el color?
Coloración= impregnación del sustrato
Reacción química= citoquímica
 
El mecanismo usual del colorante es por atracción electroestática. Por tanto

Coloración Afinidad de carga eléctrica del colorante por el sustrato celular. Pude ser:

Directa: Se produce una unión electropolar entre colorante y sustrato.
Indirecta: El colorante necesita una “pieza deunión” intermedia, a la que se denomina “mordiente”.
 Los “mordientes” suelen ser metales: aluminio, molibdeno, cromo, vanadio, etc.

METACROMASIA
Fenómeno tintorial en el que un colorante determinado tiñe a un sustrato celular en un color diferente al propio.

AZUL DE TOLUIDINA Tiñe de color ROSA los gránulos de los basófilos.

Los gránulos de los BASOFILOS contienen mucopolisacáridosácidos con grupos sulfatos [-] a menos de 5 Å unos de otros. Las moléculas de Azul de Toluidina (intensamente básicas+) se unen apretadamente configurando una tonalidad final rosada (fenómeno de basofilia).



PARTES DE UN COLORANTE.

GRUPO CROMOFORO: son grupos de átomos en resonancia (e- en vibración) que predisponen a la molécula a ser colorante.
FRACCION CROMOGENA: constituyen la...