Bioquimica

UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA UNAD

LABORATORIOS DE MORFISIOLOGIA

Curso
BIOQUIMICA

Tutor de Laboratorio
MANUEL SANTANA CARRANZA

Por

GONZALO ALBERTO MORENO S
Código. 84.459.129

LUZ YANETH RAMIREZ RODRIGUEZ
CC.
JUANA PEREA DE LA ROSA
Código:
11 de Noviembre del 2011

Santa Marta

INTRODUCCION

A continuación en los dos siguientes informes delaboratorio encontraremos la realización de unos laboratorios. El primero de Degradación Enzimática de Polisacáridos (Almidón) y el segundo Reconocimiento de Aminoácidos, Péptidos y Proteínas.
Aplicando en cada uno de los laboratorios lo aprendido en el curso de Bioquímica, fundamental para el desarrollo de cada una de nuestras carreras y de la vida diaria.

OBJETIVOS

1. Conocer y poner enpráctica una técnica para la identificación de almidones en productos alimentos
2. Verificar los efectos químicos de la amilasa salival en el metabolismo de los almidones
2. Identificar algunos factores físicos y químicos que pueden alterar los resultados de la prueba

Práctica Nº1:

DEGRADACIÓN ENZIMÁTICA DE POLISACÁRIDOS (ALMIDÓN)

II. FUNDAMENTO TEÓRICO
Reacciones Coloreadas DelAlmidón
Una reacción característica para reconocer el almidón es la aparición de una coloración azul al combinarse con la disolución de iodo en ioduro potásico. La reacción de los polisacáridos, en particular del almidón, con iodo es un proceso complejo. La coloración que aparece depende de la estructura de polisacárido. En el curso de la reacción se forma un complejo del polisacárido con iodo. Esteproceso es bien expresado en el caso de la amilosa. En el caso de los polisacáridos de cadenas ramificadas, por ejemplo, la amilopectina y el glicógeno, junto con el proceso de formación del complejo, tiene gran importancia también el proceso de adsorción de iodo sobre la superficie de las moléculas ramificadas. Se ha demostrado la relación entre la longitud de las cadenas laterales y lacoloración resultante de la reacción con yodo.
La a-amilasa es una enzima proteica que se encuentra en la saliva humana y cataliza la degradación del almidón, que es un polisacárido de reserva vegetal. El almidón está formado por dos tipos de moléculas: la amilosa y la amilopectina, ambos polisacáridos de glucosa. La amilosa se conforma por cadenas lineales de glucosas unidas por enlaces a- C1-C4, mientrasque la amilopectina tiene, además de estos últimos enlaces, uniones C1 con C6, formando cadenas ramificadas. La a-amilasa rompe uniones C1-C4, tanto en la amilasa como en la amilopectina, dejando dextrinas lineales y ramificadas (oligosacáridos) como productos. 
Para medir la actividad enzimática de la a-amilasa, se utilizará un test colorimétrico que detecta el almidón. Para ello se contará conuna solución de iodo/ioduro de potasio (I2/IK), ya que el almidón en presencia de esta solución adquiere una coloración azulada característica. Esto tiene una explicación física: el iodo se coloca en el interior de la hélice que forma la amilosa (en las regiones hidrofóbicas), formando un complejo de color azul. Cuando la a-amilasa actúa, degrada la amilosa, se desintegra la hélice y por tanto enpresencia de I2/IK ya no dará una coloración azul.
Por lo tanto, en este TP mediremos la desaparición de sustrato (evidenciada por el test colorimétrico) para determinar la actividad de la enzima. Además, analizaremos cómo afectan las distintas condiciones en que actúa la enzima (pH, temperatura, concentración de NaCl), así como los efectos que pueden causar diferentes pretratamientos(proteinasa, calor).
La dilución óptima nos indicará cuánto debemos diluir la saliva para que se logre el efecto acromático dentro del rango propuesto (2-8 minutos).

MATERIALES
* -Gradilla
* -Tubos de ensayo
* -Pipetas
REACTIVOS.
* -Almidón, disolución al 1 %.
* -Disolución de Lugol
* -Hidróxido sódico, disolución al 10%
* -Alcohol etílico

PROCEDIMIENTO.
a) En un...