bioquimica

Manual de Prácticas de Bioquímica

UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO
Campus Irapuato-Salamanca
División Ciencias de la Vida

Manual de Prácticas de Bioquímica

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona
Dra. Guadalupe Ortiz
Dr. Rubén Salcedo-Hernández

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

Manual de Prácticas de Bioquímica

INTRODUCCION
La mayoría de las técnicas experimentales y conocimientos que se hanadquirido en otros cursos son muy valiosas en el laboratorio de Bioquímica. En
este laboratorio raramente se aíslan productos en gran escala, mas bien, se
trabaja con miligramos o con microgramos. Los conocimientos metodológicos
para estudiar las biomoléculas avanza a grandes pasos y en la mayoría de las
ocasiones se requieren reactivos y equipos costosos, por lo que es mas que
imposibleabarcar la extensa gama de conocimientos relacionados con protocolo
bioquímicos.
El manual de Bioquímica lo hemos preparado con algunas prácticas sencillas, y
representativas, que intentan explicar algunas de las propiedades de la
biomoléculas y técnicas para estudiarlas. Se espera que el estudiante adquiera
los conocimientos necesarios para entender cursos posteriores que pudiera
tomar durantela licenciatura o bien en algún postgrado dentro del área biológica.
Expresamos nuestro más sincero agradecimiento a los alumnos Tania
Amaral Naranjo (Ingeniería en Alimentos) y Euleterio Carrillo Serna (Ingeniería
Agrícola), quiénes durante su Servicio Social Universitario colaboraron de
manera extraordinaria en la preparación del presente manual. Finalmente, un
profundo reconocimiento a lassugerencias hechas por los alumnos quienes han
tomado el curso de Bioquímica en nuestro Instituto.

Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

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Manual de Prácticas de Bioquímica

INDICE DEL CONTENIDO
Introducción
Prácticas
1.Guía breve para el trabajo en el laboratorio de Bioquímica y reporte
de prácticas
2. Determinación del pH y preparación de soluciones amortiguadoras
3. Separación deplásmidos en geles de agarosa
4. Determinación del tamaño de un fragmento de DNA clonado en un
plásmido
5. Aislamiento de plásmidos de Escherichia coli mediante
minipreparaciones
6. Propiedades iónicas de los aminoácidos
7. Identificación de aminoácidos y proteína
8. Cromatografía en capa fina y/o papel
9. Solubilidad y desnaturalización de proteínas
10. Determinación aproximada del puntoisoeléctrico
11. Métodos espectofotómétricos y determinación de proteínas
12. Actividad de la amilasa sobre el almidón
13. Identificación de carbohidratos

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Dr. J. Eleazar Barboza-Corona

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Manual de Prácticas de Bioquímica

Práctica No.1
Guía breve para el trabajo en el laboratorio deBioquímica y
reporte de prácticas
Seguridad en el laboratorio
Deben tenerse presente las reglas generales de seguridad. Se debe estar
conciente que los reactivos utilizados en el laboratorio son potencialmente
tóxicos, irritantes o inflamable. Sin embargo estas sustancias son peligrosas solo
cuando no se manipulan correctamente.
Limpieza del material de vidrio
Los resultados de losexperimentos, dependen en gran parte, de la limpieza del
equipo: 1) muchos reactivos se usan en miligramos o microgramos, por lo tanto
cualquier contaminación,podría contribuír a un porcentaje significativo de la
muestra experimental total del experimento. 2) Muchas sustancias son sensible
a uno o más contaminantes, como iones metálicos, detergentes o residuos
orgánicos.
La libreta de laboratorio
Esmuy importante hacer un diagrama de flujo antes de iniciar la sesión. Los
procedimientos, detalles, observaciones y resultados se deben registrar en una
libreta de laboratorio mientras el experimento se esta llevando a cabo.
Guía breve para el reporte de práctica
Introducción
Breve resumen de conceptos y/o importancia del tema. La información debe
tener relevancia para la práctica y no...