bioquimica

Resumen
Este trabajo muestra el análisis microbiológico de bacterias coliformes en aguas residuales recolectadas de distintos lugares. Se realizaron diluciones seriadas hasta 10-4 y posteriormente se inocularon 100 ul en un medio siendo incubados a 37°C por 48 horas. Este proceso permitió observar el crecimiento de bacterias coliformes teniendo la capacidad de reproducirse fuera delintestino y así mientas mayor sea el número de coliformes, mayor será la probabilidad de estar frente a una contaminación fecal reciente. Se obtuvo un crecimiento de 89 colonias siendo el valor más alto a diferencia de las otras muestras de agua residual y una concentración de 8,90E+03 u.f.c/ml.
Introducción
El agua es la fuente de enfermedades infecciosas más importante, por tanto, lapotabilización del agua es la medida de salud pública más importante. Mientras que la presencia de unos pocos microorganismos no patógenos en el agua puede ser tolerable, la presencia de organismos indicadores específicos puede indicar que esa agua puede estar contaminada con patógenos (Brock, 2004).
Estos organismos indicadores están asociados con el tracto intestinal; su presencia indica contaminaciónfecal en la fuente de esa agua y estos son los coliformes que son bacterias, Gram negativas aeróbicas o aeróbicas facultativas que fermentan lactosa con producción de gas cuando se incuban a 35°C durante 48h. Para el aislamiento de los gérmenes patógenos puede necesitarse la concentración de grandes volúmenes del agua sospechosa y la utilización de medios selectivos (Madigan, 2004).
Losestándares de agua potable en los Estados Unidos están especificados por el Decreto de Agua Potable, el cual proporciona el marco para el desarrollo de los estándares de agua potable, el número de coliformes para que el agua sea considerado potable no puede exceder los siguientes niveles: (1) 1/100 ml como la media aritmética de todas las muestras tomadas por mes; (2) 4/100 ml en más de una muestra cuandomenos de 20 muestras son tomadas por mes; o (3) 4/100 ml en más del 5% de las muestras o más son tomadas por mes. Los resultados son enviados a la Agencia para la Protección Ambiental de los Estados Unidos y, si no cumplen los estándares prescritos se notifica a los usuarios y se tomen las medidas para corregir el problema (Brock, 2004). Por tanto el objetivo de la presente práctica es analizarmicrobiológicamente ciertas muestras de agua residuales recolectadas de distintos lugares.
Material y métodos
Para la realización de la práctica primero se esterilizó cajas Petri, puntas para micropipetas en las respectivas cajas en un autoclave a 15 psi por 15-20 minutos y luego se introdujo el material en una estufa calentado a 60°C por 3 horas y para los blancos de dilución se colocó 9 ml deagua de llave y se esterilizó en autoclave a 15 psi por 15-20 minutos.
Para la preparación del medio selectivo se utilizó agar chromocult en el que se pesó 13.25 gramos para 500 ml de agua destilada a la que se le introdujo un agitador magnético esto fue colocado en un parrilla magnética y luego en un baño María a 40°C hasta que la temperatura fue soportada por el dorso de la mano.Posteriormente concluido el ciclo de esterilización se realizó diluciones seriadas hasta 10-4 con cada muestra de agua residual con ayuda de una micropipeta y se sembró 100 ul de cada dilución en cada caja Petri por la técnica de difusión en placa en una cámara de flujo Streamline ISO 14644 y se incubo a 37°C por 48 horas.

Resultados
Calculo demostrativo para Unidades Formadoras de Coloniasu.f.c/ml=(N*FD)/Vi
Dónde:
N: Número de colonias
FD: Factor de dilución
Vi: Volumen inoculado
u.f.c/ml=(34*1E+02)/(0.1 ml)
u.f.c/ml= 3,40E+04


Tabla #1: Número de colonias y u.f.c de una muestra de agua empozada sector Terremoto. Grupo 1
Dilución E. coli C. Fecales G- Totales u.f.c/ml
1E+01 4 41 38 83 8300
1E+02 0 14 18 32 -
1E+03 0 7 1 8 -
1E+04 0 1 0 1 -
Blanco 0 0 0 0 -



Tabla #...