Biotecnologia

Práctica N0. 1 : B

Tema: Identificación de la diversidad microbiana en un microambiente, y caracterización microbiológica. Parte 1

Actividades generales

1. Caracterizarmicroorganismos:
a. Identificar los tipos de bacterias por coloración de Gram
2. Aislamiento de microorganismos: Aerobios, Anaerobios, Mohos-levaduras
3. Examinar presencia de protozoarios.

Materiales yEquipos

Material por grupo
Columna de Winogradsky con cultivo activo
Reactivos para coloración de Gram
Cajas pertri con agar nutritivo
Cajas petri con agar patata
Cajas petri con agarMac Conkey
Cámara anaeróbica
Asa de cultivo
Incubadora
Auoclave
Mechero Bunsen
Microscopio
Placas portaobjetos
Cubreobjetos
Aceite de inmersión
Cubeta para coloración
Pinzas
Goteros
PisetasPapel absorbente


PROCEDIMIENTO

1. A partir del cultivo puro preparar un frote, teñir con Gram y observar con objetivo 100x (ver Figura 3).

a. Retirar las placas de la columna,dejarsecar totalmente la preparación a temperatura ambiente.
b. Fijar el frote con calor, para ello cuando el frote está perfectamente seco pasar el portaobjetos por la flama del mechero de cuatro a cincoveces y dejar enfriar.
c. Cubrir el frote fijo con 3 gotas de cada uno de los colorantes básicos y reactivos de la coloración de Gram y dejar actuar durante 1 minuto. Excepto el alcohol-cetona quese deja 2 segundos.
d. Sobre una charola escurrir el colorante y lavar la preparación con el mínimo de agua, para ello inclinar el portaobjetos y en la parte superior aplicar el agua con una piseta demanera que resbale sobre el frote.

e. Colocar el portaobjetos inclinado sobre una toalla de papel absorbente y dejar secar a temperatura ambiente.
f. Observar al microscopio con los objetivosde 10x, 40x y 100x.





Esquematizar sus observaciones y describir las características de los microorganismos observados empleando los términos adecuados respecto a la morfología, agrupación...