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Parámetros de la cromatografía
La cromatografía agrupa un conjunto importante y diverso de métodos, que permite a los científicos separar componentes estrechamente relacionados en mezclas complejas, lo que en muchas ocasiones resulta imposible por otros medios. En todas las separaciones cromatográficas, la muestra se desplaza con una fase móvil, que puede ser un gas, un líquido o un fluidosupercrítico. Esta fase móvil se hace pasar a través de una fase estacionaria con la que es inmiscible, y que fija a una columna o a una superficie sólida. Las dos fases se eligen de tal forma que los componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre la fase móvil y la fase estacionaria. Aquellos componentes que son fuertemente retenidos por la fase estacionaria se mueven lentamente conel flujo de la fase móvil.
Clasificación de los métodos cromatográficos
Los métodos cromatográficos se pueden clasificar de dos modos distintos. El primero de ellos se basa en la forma en que las fases estacionaria y móvil se ponen en contacto.
En la cromatografía en columna, un tubo estrecho contiene las fases estacionaria a través de la cual hace pasar la fase móvil por presión
En todoslos casos de cromatografía en plano se emplea una capa plana y relativamente delgada de un material que a la vez es el soporte, o bien que recubre una superficie de vidrio plástica o metálica.
En la cromatografía en plano, la fase estacionaria se fija sobre la placa plana o a los intersticios de un papel; en este caso la fase móvil se desplaza a través de la fase estacionaria por capilaridad o porgravedad
Los equilibrios en los que se basan los dos tipos de cromatografía son idénticos, y la teoría desarrollada para la cromatografía en columna se adapta también fácilmente a la cromatografía en plano

Cromatograma:
Un cromatograma puede ser utilizado tanto para realizar un análisis cualitativo como cuantitativo.
Consiste en una gráfica que muestra una serie de picos que pueden servirpara identificar los componentes de una muestra.

Efectos de velocidad de migración y del ensanchamiento de banda sobre la resolución
Mientras las bandas recorren la columna, es más evidente la separación de estas pero también se hace notar un ensanchamiento que reduce la eficacia de la separación. Es necesario tener una columna lo suficientemente larga para distinguir cada una de las bandas.Además existen técnicas que que disminuyendo la velocidad de migración, pueden reducir un poco el ensanchamiento de las mismas.

En esta figura se muestra como la especie B es retenida más fuertemente, por ello se retrasa durante la migración.

Constante de distribución:
En general, la constante de distribución consiste en los equilibrios de distribución implicados en las cromatografías.
Sedescribe por ecuaciones sencillas que supone la transferencia de un analito entre las fases estacionarias y móviles.
La constante de equilibrio «k» se define por k=Cs/Cm.

Tiempo de retención
El tiempo que transcurre después de la inyección de la muestra hasta que el pico de concentración del analito alcanza el detector se denomina tiempo de retención (tR). A menudo la muestra o la fase móvilcontiene una especie que no se retiene. Cuando es así, este tipo de especies puede añadirse para facilitar la identificación de los picos. El tiempo necesario para que la especie no retenida alcance el detector, en algunas ocasiones se denomina tiempo muerto (TM).
La velocidad de migración de la especie no retenida coincide con la velocidad promedio del movimiento de las moléculas de la fasemóvil.

La velocidad lineal promedio de migración del soluto v es:

Dónde.
= Velocidad lineal promedio de migración
L= La longitud de la columna que está rellena.
tR= Tiempo de retención

De manera semejante, la velocidad lineal promedio u del movimiento de las moléculas de la fase móvil es:

Dónde:
u= Velocidad lineal promedio del movimiento de las moléculas
L= La longitud de la columna...