Caracterización De Calulas Madre Derivadas De Tejido Adiposo
RESUMEN
DEL
MATERIAL
Y
MÉTODOS
UTILIZADOS
EN
UNA
PUBLICACIÓN
CIENTÍFICA
DE
CULTIVOS
CELULARES.
El
artículo
científico
elegido
para
comentar
la
parte
de
cultivos
celulares
del
material
y
métodos
fue
el
siguiente:
High
efficient isolation
and
systematic
identification
of
human
adipose-derived
mesenchymal
stem
cells.
En
la
introducción
del
artículo
se
explica
la
importancia
de
las
células
madre
mesenquimales
derivadas
del
tejido
adiposo
y
como
éstas
con
más
fácilmente aisladas
y
cultivadas
que
las
procedentes
de
médula
ósea
humana.
También
comentan
que
todavía
no
se
han
desarrollado
métodos
eficaces
ampliamente
aceptados
para
aislar
y
cultivar
estas
células
madre
mesenquimales
de
modo
que
los
cultivos
sean
muy homogéneos,
y
las
células
estén
muy
indiferenciadas,
aunque
varios
laboratorios
han
conseguido
aislarlas
y
cultivarlas
con
éxito.
El
objetivo
que
se
plantean
en
este
artículo
es
el
de
desarrollar
un
método
muy
eficiente
para
el
aislamiento
, cultivo
e
identificación
de
este
tipo
de
células.
MATERIAL
Y
MÉTODOS:
El
tejido
adiposo
se
obtuvo
de
mujeres
que
se
encontraban
en
el
departamento
de
maternidad
de
un
hospital,
dado
que
iban
a
ser
intervenidas
para
hacerles
una
cesárea.
Dicho tejido
adiposo
se
obtuvo
del
tejido
subcutáneo
abdominal.
Estas
mujeres
estaban
sanas
y
no
se
encontraban
bajo
ningún
tratamiento
médico.
Todas
las
mujeres
fueron
informadas
y
se
pidió
su
consentimiento,
al
igual
que
dio
su
consentimiento
el
comité de
ética
de
la
universidad
de
Jilin.
• Aislamiento
y
cultivo
Una
muestra
de
5
gr.
de
tejido
adiposo
se
introdujo
en
un
recipiente
estéril
junto
con
tampón
fosfato
salino
(PBS,
0,1M)
y
se
conservó
a
4°C
durante
24
horas
antes
de su
uso.
Posteriormente
la
muestra
se
lavó
muy
bien
con
solución
PBS
que
contenía
1000
U/ml
de
penicilina
y
1000
μg/ml
de
estreptomicina.
Se
eliminó
el
tejido
conjuntivo
y
los
vasos
sanguíneos
y
se
hicieron
piezas
de
1
mmÚ.
La matriz
extracelular
fue
digerida
con
colagenasa
de
tipo
1
al
0,1%
a
37°C,
y
se
agitaron
durante
60
minutos
para
separar
las
células
estromales
de
los
adipocitos
primarios.
Para
neutralizar
la
actividad
de
la
colagenasa
tipo
1
se
añadió un
volumen
igual
de
medio
mínimo
esencial
de
Eagle
modificado
por
dulbecco
con
glucosa
baja
(L-‐DMEM)
con
un
10%
de
suero
fetal
bovino
(FBS).Posteriormente
se
filtró
para
eliminar
los
desechos
y
se
centrifugó
a
1500
rpm
durante
10...
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