CastilloGarciayWoolrichGarcia

UNIVERSIDAD VERACRUZANA
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
PROGRAMA EDUCATIVO:
QUÍMICA INDUSTRIAL
TRABAJO RECEPCIONAL MODALIDAD TESIS

IDENTIFICACIÓN QUÍMICA DE COMPUESTOS
FENÓLICOS POR CROMATOGRAFÍA DE HPLC
CON
DETECTOR
UV
DE
EXTRACTOS
ETANÓLICOS DE PROPÓLEOS RECOLECTADOS
EN LA ZONA CÓRDOBA-ORIZABA.
PRESENTA
DAVID CASTILLO GARCÍA
NALLELY LISBETH WOOLRICH ZAVALETA
DIRECTOR
M.C. MARISOL CASTILLOMORALES

ORIZABA, VER.

FEBRERO 2009

GLOSARIO
µm

Micrómetros

µM

Micromolar

CCF

Cromatografía de capa fina

cm

Centímetros

g

Gramos

HDL

Lipoproteínas de alta densidad

HPLC Cromatografía líquida de alta resolución
Km

Kilómetros

LDL

Lipoproteínas de baja densidad

m

Metros

MAW

Metanol-ácido acético-agua

MFW

Metanol-ácido fórmico-agua

Mg

Miligramos

Min

Minutos

ml

Mililitros

NmNanómetros

Rf

Factor de retención

RP

Fase reversa

UV

Ultravioleta

VIS

Visible

INDICE
Índice de figuras

4

Índice de cuadros

6

1. Planteamiento del problema
1.1 Justificación

7
8

1.2 Objetivo general

10

1.3 Objetivos particulares

10

1.4 Hipótesis

10

2. Marco teórico

11

2.1 Propóleo

12

2.2 Tipo de vegetación en la zona Córdoba-Orizaba

13

2.3 Recolección del propóleo

132.4 Equipo de seguridad para muestreo de propóleo

14

2.5 Propiedades y composición

18

2.5.1 Metabolitos

20

2.5.2 Flavonoides

23

2.5.3 Vía del ácido Shikímico

25

2.5.4 Vía de los Policétidos

27

2.5.5 Biosíntesis de los flavonoides

28

2.5.6 Capacidad antioxidante de los flavonoides

32

2.6 Clasificación de los flavonoides

34

2.7 Extracción y aislamiento

39

2.8 Usos

40

3.Metodología

42

3.1 Metodología de Flavonoides por HPLC

43

3.2 Capacidad antioxidante por el método de DPPH

49

4. Resultados y discusión

52

4.1 Identificación y cuantificación de flavonoides por medio de HPLC.

61

4.2 Actividad antioxidante por el método DPPH

72

5. Conclusiones

76

6. Referencia bibliográfica

78

7. Anexos

82

INDICE FIGURAS
Figura

Página

1

Buzo o mameluco

14

2

Careta15

3

Guantes

15

4

Ahumador

16

5

Pinzas

16

6
7

Calzado

17

Polainas

17

8

Ruta de metabolitos secundarios

22

9

Estructura base de un flavonoide

23

10

Ruta de Biosíntesis de Flavonoides

25

11

Vía del ácido Shikímico

26

12

Ruta de los compuestos derivados de la ruta del ácido Shikímico

26

13

Ruta de los policétidos

28

14

Síntesis de la Chalcona

29

15

Ruta fenilpropanoide y ruta flavonoide

30

16

Biosíntesis de flavonoides. (Estructuras)

31

17

Mapa de Nevería y Tenango

46

18

Mapa de Campo Grande

46

19

Ahumar la zona de recolecta

53

20

Ahumar la colmena

53

21

Cantidad de propóleo

54

22

Recolección de propóleo

54

23

Condiciones de la colmena

54

24

Propóleos

54

25

Toma de muestra

55

26

Toma de muestra

55

27

Propóleo

55

28Propóleo

55

29

Cromatograma de Nevería

61

30

Cromatograma de Tenango

63

31

Cromatograma de Campo Grande

64

32

Cromatograma de Muestra de Nevería a λ= 290 nm

65

4

33

Cromatograma de muestra de Neveria a λ= 340 nm

67

34

Cromatograma de muestra de Tenango a λ= 290 nm

68

35

Cromatograma de muestra de Tenango a λ= 340 nm

69

36

Cromatograma de muestra de Campo Grande a λ= 290 nm70

37

Cromatograma de muestra de Campo Grande a λ= 340 nm

71

5

INDICE DE CUADROS
Cuadro

Página

1

Clasificación de flavonoides

38

2

Estándares

44

3

Método para flavonoides en HPLC

48

4

Preparación de muestras

50

5

Preparación de CAPE

51

6

Preparación de Vitamina C

51

7

Muestra de Nevería

56

8

Datos muestra nevería

57

9

Vegetación encontrada en la zona derecolección

58

10

Muestra de Tenango

58

11

Vegetación encontrada en la zona de recolección

58

12

Muestra Campo Grande36

59

13

Vegetación encontrada en la zona de recolección

59

14

Composición de muestras

60

15

Datos de cromatograma Nevería

62

16

Datos de cromatograma Nevería

62

17

Flavonoides identificados en muestra Nevería

62

18

Flavonoides identificados en muestra Campo...