CETOACIDO

 CÁTEDRA: BIOQUÍMICA
Carreras: Farmacia
Profesorado en Química
Licenciatura en Química
Licenciatura en Alimentos


CADENA RESPIRATORIA Y FOSFORILACIÓN OXIDATIVA

1) Indique si las afirmaciones hechas a continuación son verdaderas o falsas.
a) La respiración puede ocurrir sólo enpresencia de O2.
b) El dispositivo molecular para la respiración se encuentra sólo en las células eucariotas.
c) Las proteínas transportadoras de electrones que tienen FAD como grupo prostético se denominan citocromos.
d) La relación P:O es igual a 2,5 para el FADH2 en la mitocondria.
e) El amital bloquea la formación del ATP de la oxidación del isocitrato, pero no de la del succinato.
f) Enpresencia de un desacoplante la energía obtenida del transporte de electrones se disipa como calor.

2) La inyección de dinitrofenol a una rata produce un aumento inmediato en su temperatura corporal. ¿Puede explicar por qué?

3) Un laboratorio farmacéutico le envió a usted muestras de dos nuevos compuestos metabólicos para caracterizarlos como posibles antibióticos. Utilizando una preparaciónaislada de mitocondrias de hígado e incubada con piruvato, O2, ADP, y Pi, usted observa que la adición del compuesto "A" bloquea tanto el transporte de electrones como la fosforilación oxidativa. Cuando agrega el compuesto "B" además del "A", observa con sorpresa que se restablece el transporte de electrones pero no la fosforilación oxidativa. a) ¿Cómo clasificaría estos compuestos teniendo en cuentasu modo de acción en el transporte de electrones y la fosforilación oxidativa? b) Nombre un par de sustancias conocidas que podrían dar el mismo resultado.

4) Se prepararon mitocondrias y se determinó el consumo de O2 en 0,2 ml de la preparación en estado 4, en estado 3 y desacoplado, en presencia y en ausencia de una sustancia M (ver tabla). Indique qué tipo de inhibidor es M y justifique surespuesta.

CONDICIÓN
SUSTANCIA M (nM)
CONSUMO DE 02 (moles de át O/min)
ESTADO 4
0
11
ESTADO 4
0,5
4
ESTADO 3
0
80
ESTADO 3
0,5
30
DESACOPLADO
0
85
DESACOPLADO
0,5
33


5) Cuatro transportadores: a, b, c y d, cuyas formas reducidas y oxidadas pueden ser distinguidas espectrofotométricamente, se requieren para la respiración en un sistema de transporte de electronesbacteriano. En presencia de sustrato y oxígeno, tres inhibidores diferentes bloquean la respiración, obteniéndose los patrones de los estados de oxidación que aparecen en la Tabla. ¿Cuál es el orden de los transportadores en la cadena desde los sustratos hasta el oxígeno?

Tabla: Efecto de los inhibidores sobre los niveles de oxidación de los transportadores en una vía hipotética de transporte deelectrones (+ y - indican las formas totalmente oxidadas y reducidas, respectivamente).

INHIBIDOR
a
b
c
d
1
+
+
-
+
2
-
-
-
+
3
+
-
-
+

6) a) Se determinó (en presencia de distintas concentraciones de una sustancia "A" y "B") la velocidad de consumo de oxígeno en mitocondrias intactas en las siguientes condiciones: estado "3", estado "4" y en presencia de un desacoplante. Elsustrato empleado fue malato-glutamato. Los resultados se grafican abajo. Indique si las sustancias "A" y “B” son inhibidores de la síntesis de ATP, de la cadena respiratoria o desacoplantes. Justifique brevemente.

b) Se estudió el efecto de distintas concentraciones de una sustancia "C" y "D" (inhibidores del transporte de electrones) sobre el consumo de oxígeno en partículas submitocondrialesutilizando como sustrato: NADH, succinato y ascorbato + tetra metil p fenilen diamina (TMPD). Precise lo mejor posible el lugar de acción de la sustancia "C" y "D" en la cadena respiratoria. Justifique brevemente.


7) Una suspensión de mitocondrias consume 24 µmol O2/min en presencia de malato y glutamato. Al agregar 2,8 mmoles de ADP y Pi en exceso el consumo se acelera a 211 µmol O2/min...