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BIOL 3010L
Ejercicio #2
Equipos de laboratorio


Introducción

Durante este semestre estaremos realizando una serie de ejercicios de laboratorio que requieren el manejo de distintosartefactos. En este primer ejercicio estaremos revisando el uso apropiado de algunos de ellos, para facilitarles el trabajo en futuros experimentos.


El espectrofotómetro
Uno de los instrumentosprincipales del laboratorio de biología celular es el espectrofotómetro. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática (de un largo de onda particular) a través de unamuestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al fisiólogo realizar dos funciones:
1. Nos da información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.Esto podemos lograrlo midiendo la absorbancia (Abs) a distintos largos de onda (l) y graficar estos valores en función del largo de onda, formando un espectrograma. Como cada sustancia tiene unaspropiedades espectrales únicas, distintas sustancias producen distintos espectrogramas. Esto se debe a que cada sustancia tiene un arreglo de átomos tridimensional particular que hace que cada sustanciatenga características únicas. Al ser expuestos a la luz del especrofotómetro, algunos electrones de los átomos que forman las moléculas absorben energía entrando a un estado alterado. Al recuperar suestado original, la energía absorbida es emitida en forma de fotones. Esa emisión de fotones es distinta para cada sustancia, generando un patron particular, que varía con el largo de onda usado.Dependiendo del largo de onda, será la cantidad de energía absorbida por una sustancia, lo que logra generar un espectro particular al graficar Abs vs l
2. Nos dice cuanta cantidad de la sustancia quenos interesa está presente en la muestra. La concentración es proporcional a la absorbancia, según la Ley Beer-Lambert: a mayor cantidad de moléculas presentes en la muestra, mayor será la cantidad...
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