Colonias, tinción de gram

PRUEBAS METABOLICAS
PARTE II


Catalasa
● Comprobar la
presencia de la enzima
catalasa.
● Reactivo peróxido de
hidrógeno 30%
(superoxal).
● Staphylococcus
positiva y
Streptococcus negativo

Coagulasa
● COAGULASA
PLACA determina la
coagulasa ligada
● COAGULASA
TUBO determina la
coagulasa libre y
ligada.
● Se utiliza plasma
más BHI al 50 %

Dnasa
● Se produce ladesnaturalización de la
Dnasa presente en el
medio de cultivo.
● Revelador: HCl 8,28 %
(1 N) e indicador azul
de toluidina O
● S.aureus y
Pseudomonas
aeroginosa positivas

Azul de toluidina O

Prueba de la optoquina
● Para el diagnóstico del
Streptococcus
pneumoniae
● Leer:Sensible cuando hay
inhibición alrededor del disco.
Resistente, cuando el
crecimiento no es inhibido
alrededordel disco

Prueba de CAMP
● Se da por una
interacción entre el
factor CAMP, con la
Beta-hemolisina del
S.aureus
● Identificar Listeria y
S.agalactiae

Fundamento:
Se basa en que los estreptococos del
grupo B producen un factor llamado
CAMP (factor de
monofosfato de adenina cíclica) que
aumenta la zona de
hemólisis producida por un estafilococo
productor de ßlisina.Gelatinasa
● Capacidad de un MO de
producir enzimas
proteolíticas que licuan la
gelatina.
● Se determina por la
solidificación o licuefacción
del medio en refrigeración o
formación de halos cuando
se revela con mercurio
sublimado en cajas de petri.
● S.aureus es positiva y V.
cholerae

Prueba de la oxidasa
● Presencia de enzimas
oxidasas.
● Reactivo de Nadi o
diclorhidrato detetrametil
p-fenilendiamina.
● Pseudomonas y
Neisserias positivas
● Grampositivas son
oxidasa negativa.
Micrococcus es positivo

Pyrrolidonyl-B-naphthylamida
(PYR)
● Es hidrolizado por
100% de S.
pyogenes y de
Enterococcus
● Reemplaza la
bacitracina y STX.
● Disco + colonia, 2’
aplico reactivo
dimetilaminocinnam
aldehido

● Detecta la alfanaftilamina libre que
se libera porhidrólisis del PYR
(rojo).

+

-

● Hidrólisis de la peptidasa
● Después de la hidrólisis por la
peptidasa la naftilamida resultante
produce un color rojo al adiciónale
ciannamaldehìdo
● Esta técnica es mas sensible que la
bacitracina para la identificación de

PROTOCOLO PARA SIEMBRA
DE MUESTRAS CLÍNICAS
Para la siembra se utilizan :

●patrones de estrías de muestras
sobre placas decultivo con el fin
de obtener colonias bacterianas
aisladas

●patrones de estría de las muestras
para hacer un recuento
semicuantitativo
●técnica para inocular un tubo de
agar inclinado con asa de
inoculación recta.

● Siembra masiva ej.: UROCULTIVO,
líquidos estériles
● Siembra por agotamiento:coprocultivo,
frotis faringeo,material purulento
● Para recuento: urocultivos, catéter,lavado bronquial

COLORACIONES

Tinciones bacterianas
Las bacterias se pueden observar por
microscopia óptica, bien en fresco o
teñidas.
El examen en fresco se hace entre
lamina y laminilla o en gota pendiente
para visualización y movilidad de algunas
bacterias o de fondo oscuro.

● Tinción negativa o indirecta: se utiliza
sustancia ácida y opaca (nigrosina, tinta
china) que sedeposita alrededor de la
bacteria, sin teñirla, resaltando su
contorno. Se observa capsulas (tinción de
Burri) y la reacción de Quellung es una
reacción de precipitación que permite
visualizar la cápsula.
● Tinción simple: con colorantes básicos
para observar morfología (violeta, lugol,
azul de metileno)

En la tinción simple:
Se utiliza un solo colorante, por lo que
todas lasestructuras celulares se tiñen
con la misma tonalidad (Tinta china, Azul
Metileno de Loeffler, Azul de lactofeno(
hongos)

● El Hidróxido de potasio al 10%
(solución de KOH) permite ver elementos
de hongos ya que el KOH digiere
parcialmente los componentes proteicos,
por ejemplo de la célula huésped, pero no
actúa sobre los polisacáridos de las
paredes celulares de los hongos.

● La...