COLORACION GRAM

COLORACION GRAM
FUNDAMENTO
De gran importancia en Microbiología porque permite diferenciar dos grandes grupos de bacterias (Gram+ y Gram-), según se comporten ante esta tinción. El fundamentoradica en la diferente estructura de la pared celular de ambos grupos: las bacterias Gram+ tienen una gruesa capa de peptidoglicano en su pared, mientras que las bacterias Gram- tienen una capa depeptidoglicano más fina y una capa lipopolisacarídica externa. Tras la tinción con el primer colorante (Cristal violeta) se efectúa un lavado con etanol que arrastrará al colorante sólo en las Gram (-),mientras que en las Gram (+) el colorante queda retenido y las células permanecerán azules. Las células Gram (-) se teñirán después con un colorante de contraste (safranina) para que puedan observarse.Factores que considerar en la tinción de Gram :
No se debe sobrepasar los tiempos de tinción y decoloración. Los cultivos viejos hacen que las bacterias Gram positivas se tiñan parcial o totalmente decolor rosa. Hay que tomar en cuenta que el agua usada en el frotis se encuentre en el rango de Ph 7-7.8 ya que: *Los Gram positivos pueden hacerse gramnegativos al aumentar la acidez. *Losgramnegativos pueden hacerse Gram positivos al aumentar la alcalinidad.
AGAR SANGRE
El agar sangre es una combinación de un agar base (agar nutritivo) con el agregado de 5 % de sangre ovina, también puede usarsesangre humana, para cultivos en una placa de Agar. El agar sangre aporta muchos factores de enriquecimiento. Se usa también para ver la capacidad hemolítica de los microorganismos patógenos (que es unfactor de virulencia). Observando los halos hemolíticos alrededor de las colonias se determina el tipo de hemólisis que posee:
Alfa: halos verdosos (reducción de la hemoglobina de los glóbulos rojosa metahemoglobina en el medio)
Beta: halos incoloros (hemolisis total)
Gamma: inexistencia de halos (sin hemolisis)

AGAR CHOCOLATE:
Agar Chocolate (CHOC) es un medio de cultivo enriquecido y no...