Coloraciones De Microorganismos

PRCATICA N° 3
COLORACIONES DE MICROORGANISMOS

I. INTRODUCCION.

La coloración es un proceso mediente el cual se tiñe un microorganismo o parte de ella, usando para ello un colorante que es una sustancia o compuesto químico que posee dos grupos:

* Grupo cromoforo, que le da la propiedad del color.

* Grupo auxocromo, que le confiere la capacidad de disociarse y hacerseincoloro, ambos grupos están unidos a un anillo bencénico.
Asi se tienen colorantes básicos que muestran fuerte afinidad por las porciones acidas de la celula y los colorantes acidos muestran fuerte afinidad por las porciones básicas.
Muchas veces resulta conveniente una mezcla de dos colorantes, uno básico y otro acido que tiñen de diferentes colores.
Respecto a este punto es conveniente que elestudiante aprenda cual es el mecanismo de acción de la mayoría de colorantes. Para ello deberá recordar la propiedad que tienen la proteínas, ciertos polisacáridos y acidos nucleidos de ionizarse como base o como acido.
La ionización acida se produce por la acción de los grupos carboxilos, hidroxilos o fosfóricos.
En las proteínas la ionozacion básica se realiza en el grupo amino y en otros gruposbásico depende del punto isoeléctrico.

CLASES DE COLORANTES:

A. POR SU ORIGEN: Naturales o Artificiales.

a. Naturales:

Son aquellos que se obtienen de organismos animales o vegetales, tales como: el carmín, azufran, orcina.

b. Artificiales:

Llamados también sintéticos, son aquellos que se obtienen como productos derivados de la destilación fraccionada de la hulla,generalmente se conoce con el nombre de anilina.

B. POR SU AFINIDAD TINTOREA:

a. Colorantes Ácidos:

Son colorantes que tienen por afinidad especial colorear el citoplasma, los más usados son: la eosina, fucsina acida, acido pícrico, azul de anilina.

b. Colorante Básico:

Son aquellos que tienen la afinidad especial de colorear la cromatina nuclear, entre ellos tenemos: azul demetileno, fucsina básica, azul de toluidina.

c. Colorantes Neutros:

Son aquellos que colorean a ambas estructuras, esi tenemos, leishman, giemsa.





II. OBJETIVOS

1. Realizar observaciones microscópicas de preparados en fresco y en seco

2. Adiestrarse en los métodos de coloración más utilizada

III. MATERIALES

* Laminas porta objeto y cubre objeto* Asa de kolle
* Muestras de agua estancada
* Lamina escavada
* Microscopio
* Colorantes, azul de metileno, fucsina, lugol, safranina, cristal violeta, alcohol acido, alcohol de acetona
* Cultivos bacterianos
* Aceite de cedro o inmersión.

IV. PROCEDIMIENTO

1. PREPARADO EN FRESCO

a. Entre lámina y laminilla, colocar una gota de la muestra en el centro dela lamina porta objeto con la ayuda del asa de kolle.

b. Coloque cuidadosamente el cubre objeto, evitando la formación de burbujas.

c. Observar el microscopio comenzando con el objetivo de menor aumento.

NOTA: flamear el asa de kolle antes y después de la toma de muestra para eliminar los microorganismos que se pudieran encontrar.

GOTA PENDIENTE

a. Colocar una gota demuestra en el centro de la lamina porta objeto con la ayuda del asa de kolle.

b. Aplicar vaselina o gota alrededor d ela excavación de la lamina

c. Invertir la lamina escavada y aplicar la depresión en la gota de muetra.

d. Presionar para sellar la laminilla a la lamina, invertir rápidamente y cuidadndo que la gota pendiente que no caiga.

e. Observar al microscopio con elobjetivo de menor aumento.

f. Esquematizar lo observado.

CLASES DE COLORACIONES
1. COLORACION SIMPLE:
* EXTENDIDO
Si la muestra es un liquido tomar directamente una sada y extendela en el porta objeto formando una capa fina.
Si la muestra es consistente poner en pota objetos una gota de agua destilada y en seguida con el asa de kolle tomar la muestra y extender finamente.
*...