Conceptos Y Tecnicas De Biotecnologia

INFORME
LABORATORIO NÚMERO MÁS PROBABLE DE COLIFORMES TOTALES Y FECALES

1. Toma e Identificación de las Muestras

Muestra y Clase: Arepa de Chócolo.

Marca: No aplica. Aspecto: Rugoso. Color: Amarillo. Olor: Característico.

Observaciones y datos adicionales: No se pudo asegurar un transporte óptimo dado que labolsa con que se cubrió la muestra mientras se llevaba al laboratorio no era estéril, quedando una buena parte expuesta a la intemperie. Se trató de mitigar dicho problema, cortando y descartando la parte superficial de la muestra.

2. Objetivo de la prueba

Evaluar y analizar la técnica del NMP de Coliformes Totales y Fecales en una arepa de chócolo.

3. Importancia del NMP de ColiformesTotales y Fecales

Coliformes totales es una categoría no taxonómica que es comúnmente usada para referirse a las bacterias de la familia Enterobacteriaceae, mientras que coliforme fecal se refiere más específicamente a bacterias que fermentan la lactosa, producen gas como producto del metabolismo y catabolizan el triptófano en indol y puede referirse a especies como Escherichia coli, Klebsiellapneumoniae, Enterobacter spp. o Citrobacter freundii. Los miembros de Enterobacteriaceae son bacilos Gram negativos no esporulados ubicuos en la naturaleza y están, por ejemplo, en el tracto gastrointestinal de los animales en general (principalmente los fecales); esta situación hace difícil la interpretación de su presencia en los alimentos porque la contaminación puede no provenirexclusivamente de la materia fecal y/o puede no constituir un factor potencial de riesgo. Un claro ejemplo de ello es la medición, en 1994, de dosis de Salmonella enteritidis capaces de causar enfermedad a 500000 personas, en un lote de helado que presentó un conteo de < 1 UFC de coliformes fecales por gramos de helado. Sin embargo, es generalmente aceptado, para efectos prácticos, que la detección decoliformes totales en los alimentos sugiere un mal procesamiento (índice de calidad) y que, para el caso de los coliformes fecales, la contaminación con heces es muy probable (índice de seguridad). En cuanto a las ETAs esta familia de bacterias pueden llegar a causar enfermedad de varias formas tales como producción de endo- y exotoxinas, invasión del tejido gastrointestinal e incluso invasiónsistémica vía hematógena. No obstante, cabe recordar que los coliformes totales y fecales per se pueden no constituir un peligro para la salud, de hecho hacen parte de la flora normal gástrica, de ahí que la verdadera utilidad de su determinación en los alimentos sea, fundamentalmente, considerar la posibilidad de que la fuente de contaminación posea patógenos potenciales que se consideran de la mismaetiología, ya sea las propias enterobacterias (patotipos de E. coli, Salmonella enterica subespecie enterica serogrupo tiphy y Shigella spp. p.ej.) u otros organismos como enterovirus, protozoos y helmintos, lo cual, a su vez, le convierte en un garante de la calidad del proceso productivo.

4. Resumen del procedimiento

1. Preparación de las diluciones 10-1, 10-2 y 10-3.

2.Inoculación de Caldo Lactosado Bilis Verde Brillante (BRILA).

3. Incubar a 35±2°C por 48 horas.

4. Observar producción de gas.

5. Repique en Agar EMB de los caldos BRILA con gas positivos.

6. Test de Mackenzie: Asada en caldos BRILA y Caldos Triptófano de los caldos BRILA con producción de gas.

7. Incubar a 35±2°C por 48 horas.

8. Observar colonias típicas en EMB,producción de gas en BRILA y revelar producción de indol en caldos Triptófano con cinco gotas del reactivo de Kovac.

5. Materiales y Resultados

Medio de cultivo utilizado para la confirmación de Coliformes Totales: Agar Eosina – Azul de Metileno (EMB).

Características macroscópicas de las colonias: Se observaron colonias de color azul a negro con centros obscuros y brillo metálico....