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Páginas: 5 (1139 palabras)
Publicado: 27 de octubre de 2013
TINCION DE WRIGHT
La tinción de Wright es un tipo de tinción usada para facilitar la diferenciación de los tipos de células de la sangre. Se usa principalmente para teñir frotis de sangre, para ser examinadas al microscopio.
Lleva el nombre de James Homer Wright, su descubridor, que la obtuvo modificando la tinción de Romanowsky, en 1902.
Debido a que ayuda a distinguir fácilmente lascélulas de la sangre se convirtió en una técnica muy usada para el conteo de los glóbulos blancos, una técnica rutinaria usada cuando hay sospecha de infecciones.
Consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación, así como eosina Y o eosina B.
La acción combinada de estos colorantes produce un efecto que da una coloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos yda color rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina Y.
Las propiedades de tinción dependen del enlace de los colorantes a las estructuras químicas y de las interacciones del azul B y la eosina Y. Los agrupamientos de ácidos nucleicos, las proteínas de los núcleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B, colorante básico.
La eosina Y,colorante ácido, se fija a los agrupamientos básicos de Las moléculas de hemoglobina y a las proteínas básicas.
PROCEDIMIENTO:
1. Colocar los frotis de sangre completamente secos, en la gradilla de tinción adecuada.
2. Cubrir el portaobjetos con 1–2 ml de TINCIÓN DE WRIGHT.
3. Tras 10 minutos y sin limpiar la tinción de Wright del paso 2, añadir un volumen igual
de buffer y mezclar biensoplando con cuidado sobre el portaobjetos.
4. Tras 8 minutos, aclarar bien con agua desionizada y secar al aire.
TINCION DE GIEMSA
La tinción de Giemsa es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos. La coloración de giemsa se emplea para teñir en el examen para protozoos. Este método de tinción permite también la tinción diferencial de zonas con un alto contenido de ADN, yconcretamente de uniones A-T. Esto permite distinguir perfectamente en microscopio óptico el núcleo celular, los cromosomas durante la mitosis, y en algunos casos, incluso el ADN mitocondrial. Estos organismos adquieren una coloración diferencial y se ven dentro del citoplasma de la célula huésped. La técnica de Giemsa está formada por varios colorantes: los tintes neutros utilizados combinan el azulde metileno como tinte básico y la eosina como tinte ácido, lo que da una amplia gama de colores. El azul de metileno es un colorante metacromático, de ahí que muchas estructuras se tiñan de púrpura y no de azul. El pH de la solución de coloración es crítico y se debe ajustar idealmente según diversos fijadores. La gama del pH debe estar entre 6.4 y 6.9.
PROCEDIMIENTO:
Preparamos un frotissanguíneo.
Colocamos el frotis sobre el puente de tinción, en posición horizontal.
Cubrimos el frotis con metanol durante 3 minutos. Escurrimos y lo dejamos secar al aire. Con esto procedemos a fijar el frotis.
Diluimos en un tubo de ensayo 0,2 ml de azur-eosina-azul de metileno según Giemsa con 2 ml de solución tampón pH 7,2. Es importante realizar esta dilución en el momento de la tinción, yaque el colorante precipita y no es válido para otro día.
Mezclamos suavemente en el tubo y con una pipeta Pasteur cubrimos el frotis con la dilución de colorante, dejándolo actuar durante 25 minutos.
Escurrimos y lavamos con agua del grifo. Posteriormente lavamos con tampón pH 7,2 hasta eliminar los restos del colorante. Dejamos escurrir y secamos en posición vertical.
TINCION PAPANICOLAU
La tinción de Papanicolaou es un método de tinción policrómico que consta de una tinción nuclear y un contraste citoplásmico. Tiene como ventaja una buena definición del detalle nuclear, evidenciando el patrón de cromatina; un aspecto transparente del citoplasma, que permite apreciar los grados de diferenciación celular y actividad metabólica. La tinción de Papanicolaou utiliza tres colorantes:...
La tinción de Wright es un tipo de tinción usada para facilitar la diferenciación de los tipos de células de la sangre. Se usa principalmente para teñir frotis de sangre, para ser examinadas al microscopio.
Lleva el nombre de James Homer Wright, su descubridor, que la obtuvo modificando la tinción de Romanowsky, en 1902.
Debido a que ayuda a distinguir fácilmente lascélulas de la sangre se convirtió en una técnica muy usada para el conteo de los glóbulos blancos, una técnica rutinaria usada cuando hay sospecha de infecciones.
Consiste en azul de metileno y sus productos de oxidación, así como eosina Y o eosina B.
La acción combinada de estos colorantes produce un efecto que da una coloración púrpura a los núcleos de los leucocitos y a los gránulos neutrofílicos yda color rosado a los eritrocitos. Los componentes de este efecto son el azul B y la eosina Y.
Las propiedades de tinción dependen del enlace de los colorantes a las estructuras químicas y de las interacciones del azul B y la eosina Y. Los agrupamientos de ácidos nucleicos, las proteínas de los núcleos celulares y el citoplasma inmaduro reactivo, fijan el azul B, colorante básico.
La eosina Y,colorante ácido, se fija a los agrupamientos básicos de Las moléculas de hemoglobina y a las proteínas básicas.
PROCEDIMIENTO:
1. Colocar los frotis de sangre completamente secos, en la gradilla de tinción adecuada.
2. Cubrir el portaobjetos con 1–2 ml de TINCIÓN DE WRIGHT.
3. Tras 10 minutos y sin limpiar la tinción de Wright del paso 2, añadir un volumen igual
de buffer y mezclar biensoplando con cuidado sobre el portaobjetos.
4. Tras 8 minutos, aclarar bien con agua desionizada y secar al aire.
TINCION DE GIEMSA
La tinción de Giemsa es un método habitual para el examen de frotis sanguíneos. La coloración de giemsa se emplea para teñir en el examen para protozoos. Este método de tinción permite también la tinción diferencial de zonas con un alto contenido de ADN, yconcretamente de uniones A-T. Esto permite distinguir perfectamente en microscopio óptico el núcleo celular, los cromosomas durante la mitosis, y en algunos casos, incluso el ADN mitocondrial. Estos organismos adquieren una coloración diferencial y se ven dentro del citoplasma de la célula huésped. La técnica de Giemsa está formada por varios colorantes: los tintes neutros utilizados combinan el azulde metileno como tinte básico y la eosina como tinte ácido, lo que da una amplia gama de colores. El azul de metileno es un colorante metacromático, de ahí que muchas estructuras se tiñan de púrpura y no de azul. El pH de la solución de coloración es crítico y se debe ajustar idealmente según diversos fijadores. La gama del pH debe estar entre 6.4 y 6.9.
PROCEDIMIENTO:
Preparamos un frotissanguíneo.
Colocamos el frotis sobre el puente de tinción, en posición horizontal.
Cubrimos el frotis con metanol durante 3 minutos. Escurrimos y lo dejamos secar al aire. Con esto procedemos a fijar el frotis.
Diluimos en un tubo de ensayo 0,2 ml de azur-eosina-azul de metileno según Giemsa con 2 ml de solución tampón pH 7,2. Es importante realizar esta dilución en el momento de la tinción, yaque el colorante precipita y no es válido para otro día.
Mezclamos suavemente en el tubo y con una pipeta Pasteur cubrimos el frotis con la dilución de colorante, dejándolo actuar durante 25 minutos.
Escurrimos y lavamos con agua del grifo. Posteriormente lavamos con tampón pH 7,2 hasta eliminar los restos del colorante. Dejamos escurrir y secamos en posición vertical.
TINCION PAPANICOLAU
La tinción de Papanicolaou es un método de tinción policrómico que consta de una tinción nuclear y un contraste citoplásmico. Tiene como ventaja una buena definición del detalle nuclear, evidenciando el patrón de cromatina; un aspecto transparente del citoplasma, que permite apreciar los grados de diferenciación celular y actividad metabólica. La tinción de Papanicolaou utiliza tres colorantes:...
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