Cromatografia En Capa Fina

Práctica 1: Cromatografía en capa fina
Identificación de cafeína en complementos alimenticios comerciales por cromatografía en capa fina.

Introducción
La cromatografía es un método de separación y purificación de compuestos orgánicos que depende de la distribución de ellos en la fase estacionaria. Para efectuar una separación cromatografía se requiere de una fase estacionaria sólida(adsorbente) y una fase móvil (eluyente). Se elige el adecuado para efectuar la separación considerando las solubilidades relativas de los componentes de la mezcla. La muestra se aplica en el adsorbente y luego se deja que pasen a través del adsorbente los componentes de la mezcla, que se desplazaran dependiendo de su solubilidad relativa en el eluyente y en el adsorbente. Aquellos que son mas solubles yque son menos atraídos por la fase estacionaria se desplazarán más rápido, mientras que componentes insolubles quedan en el punto de aplicación. Para el caso del papel y placa fina, después del proceso se tiene como resultado un cromatograma en el cual los componentes separados se revelan, ya sea por su color inerte o por medio de un método físico o químico.
Varios tipos de cromatografía sonposibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: sólido- líquido.
Todas las técnicas cromatográficas dependen de la distribución de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase móvil, llamada también activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relación con la otra, denominada fase estacionaria. La fase móvil puede ser un líquido o ungas y la estacionaria puede ser un sólido o un líquido.
Todos los sólidos finalmente pulverizados tienen el poder de adsorber en mayor grado otras sustancias sobre su superficie; y similarmente, todas las sustancias pueden ser adsorbidas, unas con más facilidad que otras. Este fenómeno de adsorción selectiva es el principio fundamental de la cromatografía.
R.F
Se define como la distancia querecorre la muestra desde el punto de aplicación entre la distancia que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente.
El valor de Rf depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra (tipo de adsorbente, eluyente, así como las condiciones de la placa, temperatura, vapor de saturación, etc.)

Tipos de Eluyentes
Eter de petróleo | n-pentano, n-hexano | Acetona |
Tolueno | Cicloherxano| Iso-propanol |
dieter-éter, t-butil-éter | Tetracloruro de carbono | Etanol |
Diclorometano | Éterdietilico | Metanol |
Acetato de etilo | Cloroformo | Ácidoacético |

Propiedades físicas de los solventes utilizados en la práctica de cromatografía de placa fina
| Fórmula molecular | Peso molecular | Punto de ebullición °C | Punto de fusión °C | Polaridad en agua | Solubilidad en agua % |Metanol | CH4O | 34 | 64 | -98 | 76.2 | 14.5 |
Ciclohexano | C6H12 | 84 | 81 | 6.5 | 0.6 | 0.0055 |
Acetona | C3H6O | 58 | 56 | -95 | 35.5 | 10 |
Cloroformo | C1H1Cl3 | 119 | 61 | -23 | 25.9 | 0.82 |

Las Fuentes más comunes de cafeína son:
Granos del fruto del café | 1.3-2.4% |
El fruto del cacao | 0.6% |
El guaraná | 4 % |
La nuez de cola | 2.5% |
Té mate | 1% |
Té verde o negro | 2.8%|

Objetivos
* Determinar la influencia de la polaridad del eluyente y la concentración de la muestra en la cromatografía en capa fina.
* Identificar cafeína en muestras comerciales (cafiaspirina y té verde).
Material y equipo
3 cámaras de elución
2 pipetas Pasteur
1 mortero con pistilo
2 vidrios de reloj
5 tubos de ensaye
1 gradilla para tubos de ensaye
3 pipetas de 5mL
1 pipeta de 1mL2 Vial con tapa
1 Espátula
1 Lámpara de UV
Reactivos y disolventes
Suplementos alimenticios que contengan cafeína con guaraná, te o mate y medicamentos con cafeína.
Acetato de etilo, metanol y cloroformo

Procedimiento
Elija dos muestras comerciales (A y B) para analizar tome dos pastilla de cada una triturarla bien con ayuda del mortero introducir el polvo obtenido en un tubo de ensayo y...