CROMATOGRAFIA EN PAPEL

CROMATOGRAFIA EN PAPEL Y COLUMNA


INTRODUCCION
La cromatografía engloba a un conjunto de técnicas basadas en el principio de adsorción selectiva cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla y en algunos casos identificar estos si es que no se conoce su composición, En todas las técnicas hay una fase móvil que consiste en un fluido (gas, líquido o fluido supercrítico) quearrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido. 

Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria y con la fase móvil
Los usos de la cromatografía pueden ser:
Técnica que se emplea en el fraccionamiento de proteínas. 
Determina el grado de pureza. 
Realizar el seguimiento de unareacción. 
Detectar niveles anormales de aminoácidos en sangre u orina
Los usos de estas técnicas en odontología pueden ser importantes cuando se usa la cromatografía de gases para la cuantificación de halitosis y compuestos volátiles,
En la práctica de laboratorio se utilizaron dos técnicas de cromatografía las cuales fueron…
Cromatografía en papel: Consiste en que la muestra (aminoácidos) sedeposita en un extremo del papel de celulosa (fase estacionaria), y el disolvente se hace descender por capilaridad (fase móvil).
Con el objetivo de identificar las características y comportamiento de las moléculas al separarlas.
Cromatografía en columna: Estrategia común de empacar el material de la fase estacionaria en una columna y permitir que la fase móvil fluya a través de ella, en ocasionescon ayuda de cierta presión.
Con el propósito de conocer el porqué de la variación de la velocidad de avance de ciertos compuestos.

Naturaleza del experimento
Científico.
Propósito
Conocer las características, los factores y usos para la separación de mezclas de compuestos orgánicos en la cromatografía en columna, y controlar la separación de aminoácidos e identificación de losmismos en cromatografía en papel.
Planteamiento del Problema
¿Cuáles son las diferencias y usos de las técnicas de cromatografías utilizadas en laboratorio?
¿Qué aminoácidos poseen un grado de migración más alto?
Con estas preguntas justificaremos nuestro experimento tratando de identificas las diferencias y usos de las técnicas de cromatografía y el grado de migración de los aminoácidos.Resumen
CROMATOGRAFIA EN PAPEL
Esta técnica fue empleada para controlar la separación de una mezcla con los diferentes aminoácidos en este caso fueron: cisteína, acido glutámico, glutamina y orina. La cual consta de dos fases: una estacionaria (papel Whatman) y una fase móvil (butanol, ácido acético y agua).
Se cubrió las paredes de la cámara con papel celulosa paraevitar que la presión externa influya en el proceso.
Se sembraron e identificaron las 4 sustancias diferentes en la fase estacionaria, se creó un cilindro usando grapas para su unión.
Se preparó la fase móvil con un total de 120 ml de solución de butanol, ácido acético y agua.
Se colocó el cilindro de la fase estacionaria dentro de la fase móvil, se tapó y hubo un tiempo de espera de 20 min.
Seretiró la fase estacionaria de la cámara, se removieron las grapas, se dibujó una línea hasta donde corrió la fase móvil, y se procedió a secar completamente.
En el área de revelado de roció con solución de nihidrina para la obtención de color de aminoácidos y así poder calcular el grado de migración de aminoácidos.










CROMATOGRAFIA EN COLUMNA
La Cromatografía en columna seemplea para separar mezclas o purificación de sustancias a escala preparativa. En el laboratorio se utilizó el sistema venoset al cual se le colocó un pequeño pedazo de algodón en el fondo, que tuvo la función de filtro dejando el paso solamente del hexano. Luego se agregó el bicarbonato con hexano, realizando movimientos con la varilla para que tanto el bicarbonato como el hexano ingresaran al...