cromatografia

Introducción
La cromatografía es un método físico de separación de especies químicas estrechamente relacionadas en mezclas complejas que pueden ser un gas o un líquido. Se basa principalmente enuna fase móvil y una fase estacionaria. En la fase móvil se disuelve la muestra, y esta se hace pasa por la fase estacionaria inmiscible. Existen diversos tipos de cromatografía como la de intercambioiónico, por afinidad, cromatografía liquida de alta eficacia (HPLC) y la cromatografía por exclusión molecular, siendo esta ultima la utilizada en el práctico.
La cromatografía por exclusiónmolecular o también llamada filtración en gel, es una técnica utilizada para la separación de proteínas según su tamaño o peso molecular. La capacidad de separar estas moléculas se fundamenta en el uso de ungel cuya estructura matriz consta de esferas porosas microscópicas. Esta técnica se realiza principalmente en columnas rellenas de este gel que se fabrican especialmente para llevar a cabo laseparación de las moléculas, correspondiente a la fase estacionaria. Los poros del gel poseen diferentes grados de fraccionamientos que dependerán de su tamaño. El gel que se utilizó en la experiencia fueel Sephadex G75, este es un polímero que separa las moléculas con un tamaño entre 3000 y 70000 daltons. Las moléculas que no se encuentran dentro de este rango poseen una mayor dificultad de ingresara los poros del gel o eluyen inmediatamente junto a la fase móvil (agua). Esta técnica de cromatografía posee una etapa de sembrado y elución de la muestra. Las muestras corresponden a una mezclacompleja de seroalbumina bovina (molecula aromatica) que posee un tamaño de 66463 Daltons, la fosfatasa acida de germen de trigo de 18000 daltons de tamaño y el citocromo C que es la molécula máspequeña con 12400 daltons, y la segunda muestra el azul de dextrano, polímero de elevada masa molecular equivalente a 21030 daltons de carácter no iónico.
Para la identificación de las moléculas...