Cromatografía En Capa Fina

Practica No 6 “Cromatografía en Capa Fina”
Objetivos:

* Conocer la técnica de cromatografía en capa fina, sus características y los factores que en ellas intervienen.
* Observar la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados.
* Emplear la técnica de cromatografía en capa fina como criterio de pureza e identificación desustancias.

1-Preparacion de cromatoplacas y capilares.

Introducir dos portaobjetos juntos en la suspensión de gel de sílice, dejar secar al aire y separar con cuidado.
Para aplicar las soluciones se usaran capilares, que previamente deben ser estirados en la flama del mechero.
Se preparan 6 cromatoplacas y se ordenan sobre una hoja de papel.

2-Aplicación de la muestra y efecto de laconcentración.
Se introduce la cromatoplaca a la cámara de elución. Abrir cuando el eluyente llegue casi al borde superior
Se prepara la cámara de elución con un cuadro de papel filtro dentro de ella, te tapa para que se humedezca.
Se prepara la cromatoplaca, colocando tres puntos de aplicación. Teniendo 1, 3 y 9 aplicaciones.

Se deja secar y se revelara con una lámpara de UV.

Análisisde resultados.
La muestra utilizada fue benzoina, se realizaron tres aplicaciones cada una con diferente concentración (1,3 y 9 aplicaciones respectivamente). Se puede observar claramente en la cromatoplaca que mientras mayor sea la concentración de esta mayor será la dificultad que tendrá el eluyente para correr la muestra.

Ejemplo de cálculo:

Rf1 = d1 / d2 = 3.5 / 5.6

Rf1= 0.63Rf1= 0.63

Rf3= 0.58

Rf9=0.55

v
1
3
9

3.- Polaridad de las sustancias y polaridad de los eluyentes.

La primera cromatoplaca se eluye en hexano, la segunda en acetato de etilo y la tercera en metanol.
Se colocaran las soluciones 2 y 3. Se preparan tres cromatoplacas y se colocaran 3 aplicaciones de las soluciones a cada una de ellas.

Hexano
AcOEt
Metanol
Análisis deresultados.

v
v
v
v
v
v

2
3
2
3
2
3

Rf2= 0.17
Rf3= 0.58

Rf2= 0
Rf3= 0

Rf2= 0.46
Rf3= 0.58

El objetivo de este experimento era determinar la polaridad de las sustancias problema y el eluyente más indicado para su separación y detectarlas fácilmente. Observando los dibujos hechos a escala de los experimentos realizados podemos decir que, para las muestras problema (2) y(3), el mejor eluyente es el metanol al ser el de mayor polaridad y arrastrar fácilmente los compuestos de nuestras sustancias.
Para determinar de qué compuesto orgánico son las muestras que estamos trabajando nos basamos en la polaridad de sus moléculas, ya que las moléculas de mayor polaridad quedan retenidas en la fase estacionaria mientras que las de menor polaridad avanzan una mayor distanciaa lo largo de ella.
El acetato de etilo también demuestra ser un buen eluyente porque la distancia a la que corrió nuestra muestra problema (3) fue la misma que con el metanol, pero es más apreciable la diferencia en la composición de nuestras sustancias al utilizar metanol.
El hexano simplemente no hizo correr ninguna de las dos sustancias, por ser el menos polar.

Nuestra sustancia problemanúmero (2) es la cafeína ya que es la más polar, y debido a que la silica gel adsorbe al componente más polar evitando que avance una gran distancia a lo largo de nuestra cromatoplaca.
Nuestra sustancia problema número (3) es la benzoína ya que es la menos polar, y debido a que la silica gel adsorbe al componente más polar, la benzoina no quedó sujeta a esta propiedad permitiéndole un avance demayor distancia a lo largo de nuestra cromatoplaca.


4.- Pureza de las sustancias.
Se prepara una cromatoplaca y se aplica en ella ambas soluciones.
Se eluye en AcOEt y se deja secar. Se revela en luz UV.

Análisis de resultados

La muestras utilizadas fueron benzoina (4) y benzoina + cafeína (5). Se puede observar claramente en la cromatoplaca que en la muestra no pura (5) se...