Cromatografía En Columna

PRÁCTICA No. 7 CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA
Cromatografía en columna
Objetivo:
* Emplear y conocer el método de cromatografía en columna para la separación de componente de una tableta de bioelectro.
* Conocer las características del método en cromatografía en columna.
* Determinar que compuesto contenido en la tableta fue obtenido por medio de la cromatografía en columna.* Emplear la cromatografía en capa fina para la identificación de compuestos.
* Por medio de la destilación simple obtener el compuesto inicial y su rendimiento.
Análisis de la técnica.
Se tomaron 0.4 g de una mezcla sólida de ácido benzoico contaminada con azul de metileno como muestra a separar.
Se colocó la columna de cromatografía y se introdujo hasta el fondo un pequeñopedazo de algodón con 7 mL del eluyente (AcOEt) para que al momento que se agregaran la suspensión de sílica gel con 8 g en 30 mL de eluyente no se tapara la llave de paso.
Se abrió la llave para eliminar el exceso de disolvente, cuidando de no dejar secar la silica gel (0.5 cm arriba de la sílica).
En un vaso de precipitados se disolvió la mezcla problema con 2 a 3 mL de eluyente, severtió lo más rápido para posteriormente abrir la llave para colectar el eluyente y que se adsorbiera la muestra, con cuidado para que no se secara la columna para que tuviera suficiente eluyente para completar la separación del azul de metileno y el ácido benzoico.
Previamente se marcaron los frascos viales a 6 mL, se abrió la llave y se colectaron los eluatos, después se verifico encuáles de ellos se obtuvo acido benzoico junto con sus respectivas concentraciones realizando cromatoplacas como la práctica anterior. En cada cromatoplaca se aplicaron 4 de sus fracciones. Se eluyeron las cromatoplacas en una mezcla de hexano-acetato de etilo (2 mL de hexano y 1 de acetato de etilo) y se observó en cuales fracciones hubo presencia del compuesto separado, se llevó alrevelado con la cámara de UV y la cámara de yodo. En cada cromatoplaca se observó el cambio de coloración de la mancha del producto principal en unas con mayor intensidad que otras por efecto de la concentración en cada uno de los eluatos colectados.
Con la información anterior se seleccionamos los primeros frascos viales que fueron los que presentaron mayor concentración y realizamos unadestilación simple dejando como cola 5 mL para posteriormente retiro en un reloj de vidrio y dejar que se evaporara el eluyente, quedo solo el ácido benzoico para después pesarlo y sacar el rendimiento de 85.2% con un 0.3488 g de 0.4 g
Resultados y Observaciones

Parte 1: Cromatografía en columna
Masa inicial de la muestra: 0.4 g

7g de gel de sílice + AcOEt1 2 3 4 5 6
Obtuvimos de la cromatografía en columna 6 alícuotas que posteriormente revelamos para saber que componentes estaban presentes en cada una por medio de la CCF.
Parte 2: Cromatografía en capar finaCon la revelación de las cromatoplaca pudimos
observar 8 manchas con RF igual lo que nos
indicaba que se trataba de la misma sustancia y
comoen la cromatografía en columna la primera
sustancia que baja es la menor polar y con base a
las sustancias reportadas por el fabricante la que
4 5 6 7 8 9 tiene menor polaridad es la cafeína por lo que...