cromatografía

HPLC

Capítulo 10
Determinación de los Hidratos de Carbono Presentes en la
Pasta Mediante la Técnica de HPLC.

RESUMEN
El análisis de los azúcares presentes en la pasta de papel mediante HPLC,
se ha propuesto como método para conocer la evolución de los
polisacáridos (celulosa y xilanos) durante las secuencias de blanqueo.
Primeramente ha sido necesario una adaptación y optimización dela
metódica utilizada. Una vez hallado el método idóneo, pastas TCF y ECF
con y sin pretratamiento enzimático han sido analizadas según dicho
procedimiento con el fin de obtener la proporción entre los hidratos de
carbono presentes en las pastas. El contenido de xilosa disminuye conforme
las pastas son blanqueadas. El tratamiento con xilanasa reduce de forma
importante el contenido enxilosa.

INTRODUCCIÓN
Una vez hallada la secuencia TCF que incluye una etapa de blanqueo con ozono, en la que
se consigue aumentar la selectividad del proceso, y un pretratamiento enzimático, se pasa a
la parte de la tesis en la que se pretende conseguir mayor información para poder dar una
visión más básica y comprender mejor el beneficio de los diferentes estadios de blanqueo
realizados endicha secuencia. Se empieza pues con este capítulo, una serie de estudios
con la utilización de diferentes técnicas para conseguir el propósito antes mencionado.
En el presente capítulo se determina la composición de hidratos de carbono presentes en
diferentes pastas estudiadas en anteriores capítulos. El motivo de esta investigación reside
en el hecho de que probablemente se pueda establecer unarelación entre la composición
de hidratos de carbono con la respuesta obtenida durante el blanqueo y con el desarrollo de
las propiedades de la pastas y de los papeles.
Antes de obtener los resultados definitivos, se debió poner en marcha y adaptar la metódica
de determinación de azúcares para pastas de papel de Eucalyptus globulus. La técnica

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utilizada ha sidocromatografía líquida de alta resolución (HPLC-High Performance Liquid
Chromatography).
Anteriormente en nuestro laboratorio se habían realizado estudios de determinación de
azúcares en pasta de papel (NAVAS y COLOM, 1980; VIDAL , 1982) mediante cromatografía de
gases, siguiendo la norma T 249 pm-75, enviándose a TAPPI una serie de sugerencias para
mejorar la metódica de preparación de la muestra,puesto que se habían hallado algunos
problemas en el momento de poner en práctica dicha norma (VIDAL y COLOM, 1984).
También existen unas modificaciones recomendadas por BORCHARDT y EASTY (1982), y
MCDONALD y GARBY (1983) para la mejora de dicha norma. De hecho, la propia norma
sugiere que se realice una adaptación de la misma para cada tipo de pasta que se quiera
analizar.
Para pasar unamuestra de pasta por cualquier técnica de cromatografía antes debe
realizarse una hidrólisis a fin de obtener los monosacáridos correspondientes para así poder
ser cuantificados. El problema adicional que presenta la utilización de la cromatografía de
gases es que, además, debe realizarse una reducción y posterior acetilación de los
monosacáridos puesto que no son volátiles. Esto complica yhace más laboriosa la
preparación de la muestra antes de ser analizada. Con la cromatografía líquida HPLC se
consigue simplificar la metódica, ya que solamente es necesaria la hidrólisis de la muestra.
Algunos autores se inclinan por utilizar otras técnicas para la determinación de azúcares
como son la electroforesis capilar (RYDLUND y DAHLMAN , 1995; SJÖBERG y DAHLMAN , 2000),
la espectroscopiaNMR (BUCHERT et al., 1995; TELEMAN et al., 1995) y la espectroscopia NIR
(SCHIMLECK et al., 1997).
Después de realizar una búsqueda bibliográfica, se observó una cierta discrepancia en
cuanto a la metódica a utilizar para la realización de la hidrólisis de muestras de pasta para
papel. La norma TAPPI anteriormente mencionada, efectúa una hidrólisis ácida con ácido
sulfúrico y antes de...