Cromatografía

Trabajo Práctico n°4
Cromatografía






Fresia Melina Silva Sofrás


DOCENTES:
DRA. SILVIA GONZALEZ
LIC. ROSENDO BENEDETTI
LIC. MARIEL BOQUET
CRISTINA HORAK







Introducción
La técnica de cromatografía se basa en el principio general de distribución de un compuesto entre dos fases, una fija y otra móvil.
Reducida a su fundamento, se la puede ver como la remociónselectiva de los componentes de una mezcla por acción de la fase móvil que fluye a través de la fase estacionaria. Esta técnica no solo se emplea no solo para separar componentes de una mezcla, si no también como criterio de pureza o identificación, bajo ciertas circunstancias. Mas que nada para identificar y asegurar si una sustancia está constituida por varios componentes si se observa unacorrida cromatográfica, por otro lado, si se realiza una cromatografía y no hay corrida de sustancia a través de la fase móvil, no se puede asegurar que la componga una sola sustancia

Una cromatografía cuenta con cinco pasos esenciales:
1) Armado de placa o columna: implica la disposición espacial que adoptará la fase estacionaria
2) Siembra: se refiere a contacto inicial de la mezcla a separarcon la fase estacionaria para su posterior desarrollo
3) Desarrollo: es el pasaje de la fase móvil a través de la fase estacionaria
4) Revelado: implica la localización de las zonas en que se encuentran los compuestos ya separados, cuando estos no poseen color intrínseco
5) Elución: se utiliza cuando se intenta remover lo solutos de la fase estacionaria

La cromatografía fue descubierta por elbotánico ruso, de origen italiano, Mijaíl Tswett en 1906, pero su uso no se generalizó hasta la década de 1930. Tswett separó los pigmentos de las plantas (clorofila) vertiendo extracto de hojas verdes en éter de petróleo sobre una columna de carbonato de calcio en polvo en el interior de una probeta. A medida que la disolución va filtrándose por la columna, cada componente de la mezcla precipitaa diferente velocidad, quedando la columna marcada por bandas horizontales de colores, denominadas cromatogramas. Cada banda corresponde a un pigmento diferente.



Adsorción (sólido- líquido)
Es la propiedad que presentan las moléculas de sustancias, en cualquier estado físico o en solución, de adherirse a la superficie de una sustancia sólida llamada adsorbente. Este es un fenómeno desuperficie y se fundamenta en la atracción entre el soluto y el adsorbente por formación de uniones dipolo y formación de puentes hidrógeno. Esta cromatografía depende de
-Equilibrio establecido en la interfase entre el sólido absorbido y la solución aplicada como fase móvil
-Solubilidad relativa del soluto en la fase móvil.
El soluto es adsorbido por la fase estacionaria y luego desorbido porla fase móvil, el más fuertemente atraído por el adsorbente, será el que menos corra aplicada una vez la fase móvil.
Esta cromatografía puede ser aplicada mediante tres técnicas
• Capa delgada
• Capa preparativa
• Columna
El adsorbente más comúnmente utilizado es la sílica gel (mezcla de ácidos mono y polisilícios), que pueden inducir dipolos en una sustancia que no lo posee.
Capa delgadaSe elige una fase estacionaria que es colocada de manera uniforme sobre una base (una placa), luego se aplica la mezcla a cromatografía en un extremo, y también la fase móvil, pero sin que toque la muestra en sí, y se lleva todo el sistema a una cuba saturada con el solvente móvil para que este avance sobre la fase estacionaria por capilaridad

Para poder medir el desplazamiento alcanzado porcada componente de la mezcla y por el patrón, con una medida que resulte independiente del tiempo y de las dimensiones de la placa, se utiliza el concepto de ‘relación de frente’ (Rf) y se lo define como el cociente entre la distancia recorrida por el compuesto y la distancia recorrida por el solvente móvil, este valor, si se trabaja con condiciones invariantes es una constante característica...