Cuantificacion De Adn

CUANTIFICACION DE ADN
Brito Hernández Claudia Marcela. Ficachi Palma Zurisadai. Hernández Arias Eli. Izquierdo Escobar María Isabel. López Govea Vicente Jonathan. Zapata Javier Sofía.
RESUMEN

Enla biología molecular, la cuantificación de ácidos nucleicos se realiza con frecuencia para determinar las concentraciones medias de ADN o ARN presentes en una mezcla, así como su pureza. Lasreacciones que utilizan ácidos nucleicos menudo requieren una cantidad y pureza para un rendimiento óptimo en particular. Hay varios métodos para establecer la concentración de una solución de ácidosnucleicos, incluyendo la cuantificación espectrofotométrica UV y de fluorescencia en presencia de un tinte de ADN

INTRODUCCION
El ADN tiene su absorbancia máxima en 260 nm (al igual que el ARN y lasproteínas tienen un rango de absorción aproximado de 210 nm  a 300 nm). Normalmente para ver si el ADN está bien purificado, podemos hacer una estimación recurriendo al cociente de absorción A260/A280 y menosfrecuentemente al de A260/A230. Con el primer cociente vemos el posible contenido en proteínas de la muestra, ya que la absorbancia máxima de éstas es a 280 nm. Cuanto mayor sea este cociente menorcantidad de proteínas tiene la muestra. Se consideran puros cuando tienen un cociente sobre 1,8-2,0. También puede usarse la longitud de 325 nm, en la que se verá posible suciedad de la cubeta2. Estose resume en la tabla.
Uso de la Ley de Beer Lambert es posible relacionar la cantidad de luz absorbida a la concentración de la molécula que absorbe. En una longitud de onda de 260 nm, el coeficientede extinción promedio para el ADN de doble cadena es -1 0.020 cm-1, para el ADN monocatenario es -1 0.027 cm-1, para ARN de cadena sencilla que es 0,025 cm -1- 1 y para cortos oligonucleótidos decadena sencilla que es dependiente de la longitud y la composición de base. Por lo tanto, una densidad óptica de 1 corresponde a una concentración de 50 g/ml de ADN de doble cadena. Este método de...