Cuenta De Organismos Coliformes
Páginas: 12 (2769 palabras)
Publicado: 29 de octubre de 2012
Objetivo:
Establecer el método microbiológico para determinar el número de microrganismos coliformes totales presentes en productos alimenticios por medio de la técnica de cuenta en placa.
Introducción:
El grupo de los microrganismos coliformes es el más ampliamente utilizado en la microbiología de los alimentos como indicador de prácticas higiénicas inadecuadas. Este método permitedeterminar el número de organismos presentes en una muestra (margarina) utilizando el medio selectivo de agar rojo violeta bilis, en este se desarrollan bacterias a 35°C en un lapso de tiempo de 24 horas.
El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para:
La detección de prácticas sanitarias deficientes en el manejo y en la fabricación de los alimentos.
La evaluación de lacalidad microbiológica de un producto, aunque su presencia no necesariamente implica un riesgo sanitario.
La demostración y la cuenta de microrganismos coliformes, puede realizarse mediante el empleo de medios de cultivos líquidos o sólidos con características selectivas o diferenciales.
Materiales y reactivos:
Procedimiento:
De acuerdo a la NOM 113-SSA1-1994-Cuenta organismos coliformestotales en placa y con referencias de las normas NOM-092-SSA1-Método para la cuenta de bacterias aerobias en placa y NOM-110-SSA1-Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico.
El método permite determinar el número de microrganismos coliformes presentes en una muestra, utilizando un medio selectivo (agar rojo violeta bilis) en el que se desarrollan bacterias a35°C en aproximadamente 24 h, dando como resultado la producción de gas y ácidos orgánicos, los cuales viran el indicador de pH y precipitan las sales biliares.
Preparación del medio de cultivo(según la NOM-113-SSA1):
Medio de cultivo Agar Bilis Rojo Violeta
En el caso de utilizar medio de cultivo deshidratado, seguir las instrucciones del fabricante
Mezclar perfectamente y ajustar el pH a 7,4con ácido clorhídrico 0,1N o con hidróxido de sodio 0,1N a25°C, de forma que después del calentamiento se mantenga en este valor.
Calentar con agitación constante y hervir durante 2 minutos.
Enfriar inmediatamente el medio en un baño de agua hasta que llegue a 45°C.
Evitar el sobrecalentamiento del medio.
No debe esterilizarse en autoclave.
Usar el medio dentro de las tres primeras horasdespués de su preparación.
Preparación de la muestra(Según la NOM-110-SSA1-1994):
Las muestras sólidas y semisólidas (en este caso margarina) congeladas, deben descongelarse en refrigeración de 4 a 8ºC durante 18 horas y no más de 24 horas antes de proceder a su análisis.
Pesar una cantidad de 10 u 11 g de la muestra por analizar en un recipiente o bolsa plástica estériles de tamaño adecuado.Adicionar un volumen de 90 a 99 ml del diluyente llevado a una temperatura similar a la de la muestra.
Operar la licuadora o el homogeneizador peristáltico de 1 a 2 minutos hasta obtener una suspensión completa y homogénea según se indique en la técnica correspondiente para cada alimento. Aún en los equipos más lentos, este tiempo no debe exceder de 2,5 minutos.
Permitir que las partículasgrandes se sedimenten, y transferir la cantidad deseada tomando de las capas superiores de la suspensión.
Descongelar la margarina por 18 hrs a una temperatura de 4 a 8°C, no más de 24hrs.
Pesar una cantidad de 10 a 11gr de la muestra en un recipiente o bolsa estéril.
Adicionar de 90 a 99ml del diluyente a una temperatura similar a la de la muestra.
Operar en la licuadora o en homogeneizador de1 a 2 minutos hasta obtener una suspensión completa y homogénea.
Permitir que las partículas grandes se sedimenten y transferir la cantidad deseada tomando las capas superiores de la suspensión.
Descongelar la margarina por 18 hrs a una temperatura de 4 a 8°C, no más de 24hrs.
Pesar una cantidad de 10 a 11gr de la muestra en un recipiente o bolsa estéril.
Adicionar de 90 a 99ml del...
Establecer el método microbiológico para determinar el número de microrganismos coliformes totales presentes en productos alimenticios por medio de la técnica de cuenta en placa.
Introducción:
El grupo de los microrganismos coliformes es el más ampliamente utilizado en la microbiología de los alimentos como indicador de prácticas higiénicas inadecuadas. Este método permitedeterminar el número de organismos presentes en una muestra (margarina) utilizando el medio selectivo de agar rojo violeta bilis, en este se desarrollan bacterias a 35°C en un lapso de tiempo de 24 horas.
El uso de los coliformes como indicador sanitario puede aplicarse para:
La detección de prácticas sanitarias deficientes en el manejo y en la fabricación de los alimentos.
La evaluación de lacalidad microbiológica de un producto, aunque su presencia no necesariamente implica un riesgo sanitario.
La demostración y la cuenta de microrganismos coliformes, puede realizarse mediante el empleo de medios de cultivos líquidos o sólidos con características selectivas o diferenciales.
Materiales y reactivos:
Procedimiento:
De acuerdo a la NOM 113-SSA1-1994-Cuenta organismos coliformestotales en placa y con referencias de las normas NOM-092-SSA1-Método para la cuenta de bacterias aerobias en placa y NOM-110-SSA1-Preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico.
El método permite determinar el número de microrganismos coliformes presentes en una muestra, utilizando un medio selectivo (agar rojo violeta bilis) en el que se desarrollan bacterias a35°C en aproximadamente 24 h, dando como resultado la producción de gas y ácidos orgánicos, los cuales viran el indicador de pH y precipitan las sales biliares.
Preparación del medio de cultivo(según la NOM-113-SSA1):
Medio de cultivo Agar Bilis Rojo Violeta
En el caso de utilizar medio de cultivo deshidratado, seguir las instrucciones del fabricante
Mezclar perfectamente y ajustar el pH a 7,4con ácido clorhídrico 0,1N o con hidróxido de sodio 0,1N a25°C, de forma que después del calentamiento se mantenga en este valor.
Calentar con agitación constante y hervir durante 2 minutos.
Enfriar inmediatamente el medio en un baño de agua hasta que llegue a 45°C.
Evitar el sobrecalentamiento del medio.
No debe esterilizarse en autoclave.
Usar el medio dentro de las tres primeras horasdespués de su preparación.
Preparación de la muestra(Según la NOM-110-SSA1-1994):
Las muestras sólidas y semisólidas (en este caso margarina) congeladas, deben descongelarse en refrigeración de 4 a 8ºC durante 18 horas y no más de 24 horas antes de proceder a su análisis.
Pesar una cantidad de 10 u 11 g de la muestra por analizar en un recipiente o bolsa plástica estériles de tamaño adecuado.Adicionar un volumen de 90 a 99 ml del diluyente llevado a una temperatura similar a la de la muestra.
Operar la licuadora o el homogeneizador peristáltico de 1 a 2 minutos hasta obtener una suspensión completa y homogénea según se indique en la técnica correspondiente para cada alimento. Aún en los equipos más lentos, este tiempo no debe exceder de 2,5 minutos.
Permitir que las partículasgrandes se sedimenten, y transferir la cantidad deseada tomando de las capas superiores de la suspensión.
Descongelar la margarina por 18 hrs a una temperatura de 4 a 8°C, no más de 24hrs.
Pesar una cantidad de 10 a 11gr de la muestra en un recipiente o bolsa estéril.
Adicionar de 90 a 99ml del diluyente a una temperatura similar a la de la muestra.
Operar en la licuadora o en homogeneizador de1 a 2 minutos hasta obtener una suspensión completa y homogénea.
Permitir que las partículas grandes se sedimenten y transferir la cantidad deseada tomando las capas superiores de la suspensión.
Descongelar la margarina por 18 hrs a una temperatura de 4 a 8°C, no más de 24hrs.
Pesar una cantidad de 10 a 11gr de la muestra en un recipiente o bolsa estéril.
Adicionar de 90 a 99ml del...
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