Cultivo De Lineas Celulares

CULTIVO DE LINEAS CÉLULARES

I. ANTECEDENTES
Los cultivos celulares tuvieron su origen en el siglo XIX cuando Rechlinhausen en 1866, mantuvo vivas células sanguíneas de anfibio, pero fue la utilización de bloques de agar con plasma coagulado (soporte y alimento) que marco el inicio del cultivo de células in vitro (Freshney, 1987). El desarrollo del cultivo de células de vertebrados seinició con las observaciones de Roux (1885) en cultivos de células de embrión de pollo; posteriormente Harrison (1907) cultivó tejido nervioso de rana; Carrel en 1912 aplicó esta técnica para el estudio en animales de sangre caliente. Una serie de innovaciones como el desarrollo de medios de cultivo (Eagle, 1955), el uso de antibióticos, las técnicas de tripsinización para el pasaje de células(Moscona y Moscona, 1952) y la suplementación del medio con suero fetal de diversas fuentes animales como el bovino, equino, etc, permitieron el desarrollo y aplicabilidad de los cultivos de células de origen vertebrado.
Los cultivos celulares son el producto de la colección de células animales de diferentes órganos, mantenidos en condiciones especiales propicias para su sobrevivencia y multiplicación,manteniendo para esto todas sus funciones metabólicas de una manera semejante a las que tendrían en el hospedero. Se han clasificado de acuerdo a su capacidad de anclaje (adherencia), o haber sido aisladas de un órgano determinado o si provienen de células que han sufrido modificaciones. De acuerdo a su capacidad de adherencia o no a una superficie determinada pueden crecer formando monocapa oestar en suspensión respectivamente, lo que está muy asociado con el tipo de célula de la cual derivan: por lo general las células provenientes de órganos, crecen en monocapa; igualmente existen células que pueden crecer indistintamente tanto en monocapa como en suspensión, ejemplo son las células HeLa que son células transformadas derivadas de cultivos en monocapa.

Cuando el cultivo proviene decélulas que han sido disgregadas de un tejido original tomado de un órgano de un animal recién sacrificado, reciben el nombre de Cultivo Primario; cuando éste cultivo primario es sometido a procesos de transformación que le confiere capacidad ilimitada de multiplicación (inmortales) reciben el nombre de líneas celulares.
Actualmente se define por cultivo celular al conjunto de técnicas quepermiten el mantenimiento de las células “in vitro”, conservando al máximo sus propiedades fenotípicas, genotípicas, bioquímicas e inmunológicas. En inmunología los cultivos celulares procedentes de modelos animales han tenido un papel muy importante para el desarrollo de esta ciencia. Las áreas que emplean líneas celulares abarcan un gran número de disciplinas y buscan la aproximación de los diversosfenómenos celulares en condiciones de salud y enfermedad. Por mencionar algunos de los procesos que se estudian mediante líneas celulares se encuentran: la replicación del DNA, transcripción de RNA, traducción de proteínas, liberación y/o estimulación de citocinas y factores de crecimiento, fagocitosis, expresión de moléculas de adhesión y receptores celulares, proliferación, ciclo celular,apoptosis, etc.
En un cultivo se pueden controlar todos los factores del medio: físico-químicos (pH, temperatura, presión osmótica, niveles de O2 y CO2, tensión superficial) y fisiológicos (hormonas, factores de crecimiento, densidad celular) Para estos se emplean diversas líneas celulares las cuales han son obtenidas de diversos laboratorios entre los cuales se encuentra la American Type CollectionCulture (ATCC; Rockville, MD) o bien cultivos primarios derivados de modelos animales.
II.- OBJETIVO DE LA PRÁCTICA
El alumno valorara la importancia del establecimiento, desarrollo y conservación de cultivos celulares y su importancia como herramienta en estudios inmunológicos.

III.- MATERIAL

Material que el profesor proporcionará

Material biológico
Células HeLa
.Reactivos...