DETERMINACION DE AMINOACIDOS POR ESPECTROSCOPIA UV

DETERMINACION DE AMINOACIDOS POR ESPECTROSCOPIA UV

INTEGRANTE: Cárdenas Cala Emilio

Facultad de ciencias farmacéuticas y bioquímicas
Laboratorio de Análisis por instrumentación
10 – JUNIO – 2013

RESUMEN

La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometría ultravioleta-visible (UV/VIS) es una espectroscopia de emisión de fotones y una espectrofotometría. Utiliza radiaciónelectromagnética (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagnético, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La radiación absorbida por las moléculas desde esta región del espectro provoca transiciones electrónicas que pueden ser cuantificadas.
La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos gruposfuncionales de moléculas, y además, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza de manera general en la determinación cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de metales de transición y compuestos orgánicos altamente conjugados.

Palabras claves: analito calibrado indicador buffer

1. - INTRODUCCIÓN

1.1 LA ESPECTROFOTOMETRÍA UV PARA IDENTIFICAR GRUPOSFUNCIONALES.- Desde hace muchos años se ha usado el color como ayuda para reconocer las sustancias químicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiación se puede estudiar la absorción de sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino también en ultravioleta e infrarrojo.
Se denomina espectrofotometría a la medición de la cantidad de energía radiante que absorbe un sistemaquímico en función de la longitud de onda de la radiación, y a las mediciones a una determinada longitud de onda.
La teoría ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos de energía llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda está asociada con los fotones, cada
uno de los cuales posee una cantidad definida de energía.

FUNDAMENTO TEÓRICO.-
a) Elespectrofotómetro trabaja a una longitud de onda de 190 – 380 nm aproximadamente.
b) La fuente es una lámpara de Deuterio y una cubeta de Cuarzo o Metacrilato (que es utilizado a una longitud de onda de 220 – 380 nm).
c) El UV y las moléculas.- las radiaciones del espectrofotómetro UV provocan transiciones electromagnéticas:
π π* provocado por un grupo cromóforo.
n π*provocado por un grupo auxócrono.
n σ* Este tipo de transición esta dado a una longitud de onda aproximado de (220 - 380 nm.) σ σ*

d) Las transiciones electrónicas que se dan en los aminoácidos de Fenilalanina y Triptofano
FIGURA No. 1 FENILALANINA FIGURA Nº 2 TRIPTOFANO
(Aminoácido de trabajo)(Aminoácido de trabajo)
π π* C=C
n π* C=O
Para ambos aminoácidos







e) Los aminoácidos son los monómeros fundamentales de la proteína. Las proteínas pueden ser animal o vegetal pero siempre con una función en particular.
1.2JUSTIFICACIÓN.- La espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones químicas y bioquímicas. El espectrofotómetro permite comparar la radiación absorbida o transmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

1.3 OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Determinar la concentración de muestras deaminoácidos utilizando el método de la espectrofotometría UV.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS
Determinar la longitud de onda de trabajo con el Aminoácido patrón.
Hallar la Absortividad molar de cada aminoácido.
Calcular la concentración de Fenilalanina y Triptófano en dos muestras problema.

2.- METODOLOGÍA

En primer lugar se realizó tres diluciones a partir de un patrón de concentración...