Determinacion De La Osmolaridad

OBJETIVO

Observar el fenómeno de la osmosis en soluciones separadas por una membrana semipermeable y expresar la definición de osmosis, osmolaridad y osmolalidad, y aplique estos conceptos ante los casos de deshidratación.
INTRODUCCIÓN
La membrana celular posee varios mecanismos que permiten mantener la homeostasis en el organismo, permitiendo, por ejemplo, la regulación de pH o de laconcentración de iones. Esta capacidad, principalmente se debe a la permeabilidad selectiva de la membrana celular, lo cual le permite el paso de moléculas tan esenciales como el agua.
Las moléculas se mueven a través de la membrana debido a la diferencia de presión osmótica que existe entre el medio intra y extra celular. De esta manera, una mayor concentración en el medio extracelular genera elingreso de estas partículas dentro de la célula, de igual manera si hay una mayor concentración dentro de la célula, las partículas saldrán hacia fuera de ésta. Todo esto define a la ósmosis, que es un fenómeno físico-químico relacionado con el comportamiento del agua como solvente de una solución, ante una membrana semipermeable, el resultado final es que, aunque el agua pasa de la zona de bajaconcentración a la de alta concentración y viceversa, hay un flujo neto mayor de moléculas de agua que pasan desde la zona de baja concentración a la de alta1. Con ello, llegamos a la osmolaridad y osmolalidad, una será concentración molecular de todas las partículas osmóticamente activas contenidas en una solución, expresada en osmoles (o en miliosmoles) por litro de solvente, mientras la otra seráconcentración molecular de todas las partículas osmóticamente activas contenidas en una solución, expresada en osmoles (o en miliosmoles) por kilogramo de solvente.
La presión osmótica será la fuerza aplicada en la ósmosis, lo cual, dicho de otra forma, es la fuerza creada necesaria para detener completamente el proceso de ósmosis.
Para lo anterior se estudió la permeabilidad de la membrana alanalizar la respuesta de la célula frente a cambios en el medio extracelular (soluciones isotónicas, hipotónicas, hipertónicas), observándose crenación en las muestras de sangre en medio hipertónico, y hemolisis en medios hipotónicos.
Con esta práctica podemos, también, relacionar la deshidratación, pues en la ósmosis hay un movimiento de moléculas de una zona de menor concentración a otra de mayorconcentración y viceversa, por lo que la deshidratación se relaciona a la salida de agua de la célula.
1 http://www.hidronatura.com/osmosis.html

En el desarrollo de la práctica podemos observar como el soluto, en este caso los eritrocitos se comportan de diferente manera dependiendo de la solución en la que se encuentre, todo esto dependiendo de la presión osmótica.

MATERIAL:
2 pipetasgraduadas de 5 ml
1 pipeta Pasteur con bulbo
2 matraz Erlen Meyer
1 vaso de precipitado
4 tubos de ensayo
1 tubo con anticoagulante
gradilla

Equipo:
centrifuga

Otros:
jeringa de 3 ml
torundas
alcohol
ligadura

reactivos:
cloruro de sodio al 0.9%
sacarosa
agua destilada
eritrocitos lavados

PRÁCTICA:

FASE 1

1.- Extraer 3 ml de sangre venosa, colocarlos en un tubode 12x75 mm con anticoagulante, mezclar la sangre con anticoagulante.
2.- Calibrar el tubo de ensayo con sangre con un tubo de ensayo con cloruro de sodio.
3.- Centrifugar por 2.5 minutos a 1500 rpm.

4. Extraer con la pipeta Pasteur el sobrenadante (plasma) y desechar en un recipiente adecuado para inactivar, colocado previamente.
5.- Agregar al sedimento el faltante de solución salinaisotónica y mezclar hasta resuspensión de los eritrocitos.
6.- Se calibra nuevamente para poder centrifugar.
7.- Se centrifuga de nuevo a 1500 rpm por 2.5 minutos.
8.- Repetir desde el paso 4 hasta que el sobrenadante (plasma) sea totalmente transparente.
FASE 2
1.- Se rotulan los 3 tubos de ensayo con las soluciones que estamos trabajando.
2.- Agregamos a cada uno de los tubos las soluciones...