Determinacion de LDH
Determinar a través de la utilización de la técnica espectrofotométrica el contenido de la enzima lactato deshidrogenasa presente en una muestra sanguínea para identificar estados de saludo enfermedad que pudieran estar presentes en determinados padecimientos en un marco de ética y responsabilidad con el entorno y el medio ambiente.
Marco teórico
Materiales
Muestra biológica:suero sanguíneo
Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 340 nm
Baño termostatable a 25ºC, 30ºC ó 37ºC ( 0,1ºC)
Cubetas de 1,0 cm de paso de luz
Microtubos
Puntillas
Pipetas ymicropipetas
Gradilla para micro tubos
Gradilla para tubos de ensayo
Desarrollo
Observaciones
Este proceso es más sensible a errores pero nos ayuda a encontrar las diferencias entre una coloración yotra durante el proceso. Algunos factores que pueden alterar los resultados son el tiempo y la técnica de pipeteo. Como sabemos el contenido de LDH se encuentra en el citosol, por ello al encontrarse unaruptura en la célula se libera y la LDH es encontrada en altas concentraciones por ello intencionalmente se utilizó la muestra hemolizada de Omar Ríos Sánchez.
Resultados
Fórmula utilizada:△A/min x 9690 = U/L LDH (A una temperatura de 37°C).
Lecturas: Cálculos realizados para obtener el rango: Rango:
1. 1.646 662- 1.646 = .016 .016
2. 1.662 1.644 - 1.662 = -.018
3. 1.644 1.628 - 1.644 = - .016
4. 1.628
△A/min x 9690= U/L
(.016/1) x (9690) = 155.04 U/L
Discusión de resultados
El valor normal que se estableció en esta práctica fue de 230 a 460 U/L. El resultado que se obtuvo fue de 155.04 U/L. La muestrautilizada tiene casi dos meses y se ha congelado y descongelado constantemente, por lo tanto la calidad de la muestra ha disminuido. En teoría no se debía encontrar una concentración menor.
Se le...
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