Prueba Para Detectar Ldh

Páginas: 5 (1091 palabras) Publicado: 30 de mayo de 2012
COD 11580 1 x 50 mL CONSERVAR A 2-8ºC

COD 11581 1 x 200 mL

LACTATE DEHYDROGENASE (LDH) LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)
PIRUVATO

Reactivos para medir la concentración de LDH Sólo para uso in vitro en el laboratorio clínico

FUNDAMENTO DEL MÉTODO
La lactato deshidrogenasa (LD o LDH) cataliza la reducción del piruvato por NADH, obteniéndose lactato y NAD+. La concentración catalítica sedetermina a partir de la velocidad de desaparición del NADH, medido a 340 nm1,2. Piruvato + NADH + H+
LDH

CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda el uso de los Sueros Control Bioquímica niveles I (cod. 18005, 18009 y 18042) y II (cod. 18007, 18010 y 18043), para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida. Cada laboratorio debe establecer su propio programa de Control de Calidad interno,así como procedimientos de corrección en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias aceptables.

Lactato +

NAD+

CONTENIDO
COD 11580 A. Reactivo B. Reactivo 1 x 40 mL 1 x 10 mL COD 11581 1 x 160 mL 1 x 40 mL

CARACTERÍSTICAS METROLÓGICAS
− Límite de detección: 4,7 U/L = 0,078 µkat/L. − Límite de linealidad: 1250 U/L = 20,92 µkat/L. Cuando se obtengan valores superiores,diluir la muestra 1/2 con agua destilada y repetir la medición. − Repetibilidad (intraserie):
Concentración media 324 U/L = 5,40 µkat/L 1029 U/L = 17,15 µkat/L CV 3,9% 2,3 % n 20 20

COMPOSICIÓN
A. Reactivo: Tris 100 mmol/L, piruvato 2,75 mmol/L, cloruro de sodio 222 mmol/L, pH 7,2 B. Reactivo: NADH 1,55 mmol/L, sodio azida 9,5 g/L Nocivo (Xn): R22: Nocivo por ingestión. R31: En contacto conácidos libera gases tóxicos. S28.1: En caso de contacto con la piel lavar inmediata y abundantemente con agua.

− Reproducibilidad (interserie):
Concentración media 324 U/L = 5,40 µkat/L 1029 U/L = 17,15 µkat/L CV 6,6% 3,3 % n 25 25

CONSERVACIÓN
Conservar a 2-8ºC. Los Reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite lacontaminación durante su uso. Indicaciones de deterioro: − Reactivos: Presencia de partículas, turbidez, absorbancia del blanco inferior a 1,200 a 340 nm (cubeta de 1 cm).

− Sensibilidad: 0,123 ∆mA⋅L/U⋅min = 7,41 ∆mA ⋅L/µkat⋅min. − Veracidad: Los resultados obtenidos con estos reactivos no muestran diferencias sistemáticas significativas al ser comparados con reactivos de referencia. Losdetalles del estudio comparativo están disponibles bajo solicitud. − Interferencias: La hemólisis o la tardía separación del suero ocasionan resultados elevados debido a la elevada concentración de LD en los eritrocitos. La lipemia (triglicéridos < 10 g/L) y la bilirrubina ( < 20 mg/dL) no interfieren. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir3. Estos datos han sido obtenidos utilizando unanalizador. Los resultados pueden variar al cambiar de instrumento o realizar el procedimiento manualmente.

PREPARACIÓN DE LOS REACTIVOS
Reactivo de Trabajo. Vaciar el contenido del Reactivo B en el frasco del Reactivo A. Agitar suavemente. Si se desea preparar otros volúmenes, mezclar en la proporción: 4 mL de Reactivo A + 1 mL de Reactivo B. Estable 2 meses a 2-8ºC.

MATERIAL ADICIONAL
−Analizador, espectrofotómetro o fotómetro con cubeta termostatizable a 25, 30 ó 37ºC para lecturas a 340 nm. − Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.

CARACTERÍSTICAS DIAGNÓSTICAS
La lactato deshidrogenasa se encuentra presente en todas las células del organismo aunque sus mayores concentraciones se hallan en el hígado, corazón, riñón, músculo esquelético y eritrocitos. La concentración de LDH en sueroo plasma está aumentada en pacientes con enfermedad hepática, alteraciones renales, infarto de miocardio, muchas enfermedades malignas, distrofia muscular progresiva y en casi cualquier causa de hemólisis4,5. El diagnóstico clínico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un único ensayo, sino que debe integrar los datos clínicos y de laboratorio.

MUESTRAS
Suero o plasma...
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