determinacion de pigmentos




Laboratorio de Bioquímica
“Cromatografía en papel y espectrofotometría”




















Integrantes: Álvaro Alarcón V.
Cynthia Godoy B.
Gilda González D.
Carla González L.
YeseniaOpazo S.
Profesor: Leonardo Anabalón R.
Asignatura: Bioquímica.

2 de Septiembre, 2013

Resumen
En primera instancia utilizamos hojas de espinaca para realizar el proceso dela cromatografía. Depositamos las hojas en un mortero y las molemos, agregamos acetona ya que esta nos permite extraer los pigmentos. Filtramos el extracto con papel filtro, dentro de un matraz enlermeyer. Lo que nos quedó como resultado lo utilizamos para la cromatografía en papel la cual nos permite separa pigmentos, colocamos una tira de papel filtro con la ayuda de y dejamos que los pigmentosasciendan por el papel por 15 min, luego sacamos el papel y lo dejamos secar recortamos en partes con distinta coloración los trozos cortamos los depositamos en un tubo de ensayo con las pinzas agregamos acetona y dejamos reposar 5 min, luego de esto pasamos al siguiente paso que es el espectro de absorbancia de los pigmentos fotosintéticos. Utilizamos el espectrofotómetro, hacemos un barrido deabsorbancia de las muestras luego que están registradas las lecturas de absorbancia completamos una tabla con los datos de ambas muestras.









Introducción
Toda la vida que sustenta nuestro planeta depende de la luz del sol y todo comienza con un extraordinario proceso que llevan a cabo las plantas, llamado Fotosíntesis.
Todos los organismos fotosintetizadores tienen un sistema depigmentos que absorben parte de la energía luminosa y la transforman en energía química, se destacan principalmente la clorofila y los carotenoides, todos estos pigmentos tienen diferentes colores debido a las diferentes propiedades de absorción de la luz visible que ellos presentan.
Debido a la propiedad de absorción de luz, de estos pigmentos fotosintéticos pueden ser detectados ycuantificados a través de espectrofotometría, que es una medición de la cantidad de energía radiante que absorbe un sistema químico en función de la longitud de onda.
El instrumento que se utiliza para obtener esta información se llama Espectrofotómetro. El espectro de absorción nos permite determinar aquellas longitudes de onda en las cuales una sustancia absorbe una mayor cantidad de luz.

Elproceso de obtención de pigmentos, en este laboratorio lo haremos a través de la cromatografía, que corresponde a una técnica de separación de moléculas en el papel filtro, para su posterior lectura de absorbancia en el espectrofotómetro





Materiales
Hojas de espinaca.
Mortero.
Acetona.
Pipeta
Papel filtro.
Soporte Universal
Embudo Cónico.
Matraz Erlenmeyer.
Tubos de ensayo.Espectrofotómetro.
Métodos
Cromatografía: La cromatografía engloba a un conjunto de técnicas de análisis basadas en la separación de los componentes de una mezcla y su posterior detección.
Filtración simple: La filtración por gravedad se realiza vaciando la mezcla sobre un embudo que contiene un papel de filtro. El líquido pasa a través del papel y el sólido es retenido. El embudo generalmentese soporta sobre un aro de hierro o sobre un trípode.
Espectrofotometría: Se refiere a la medida de cantidades relativas de luz absorbida por una muestra, en función de la longitud de onda.
Se tomaron Hojas de espinaca, las cuales fueron maceradas en un mortero de porcelana, se le agrego directamente 10mL de acetona y se dejó reposar durante unos 5 minutos aproximadamente.
En un soporteuniversal, se encontraban el embudo cónico, en el cual se filtró el extracto a través del papel filtro y que descendió desde el embudo hasta el matraz de Erlenmeyer.
Teniendo el matraz con el contenido de pigmentos vegetales en su interior, colocamos una tira de papel filtro evitando el contacto con las manos.
Dejamos aproximadamente unos 15 minutos a que el pigmento ascienda por el papel filtro,...