Determinacion e identificacion de pigmentos

PRACTICA 6 SEPARACIÓN, IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DE LOS PIGMENTOS CLOROPLÁSTICOS En esta práctica vamos a realizar la separación e identificación de los pigmentos cloroplásticos, por medio deuna cromatografía en capa fina. También realizaremos su identificación espectrofotométrica. Para ello procederemos del siguiente modo: Cogemos hojas de espinacas, a las que les cortaremos los nervioscentrales, y pesaremos hasta obtener 5 gr. Después cortaremos las hojas en porciones pequeñas y las añadiremos a un mortero junto a una cucharada de y 25 ml. de acetona. A continuación machacamos bienlas hojas. Seguidamente procederemos al filtrado de la solución resultante en un embudo Buchner. Hay que humedecer el filtro con una gotas de acetona, para que le filtro se adhiera bien al embudo. Unavez filtrado el extracto verde se introduce en un embudo de decantación junto con unas gotas de éter de petróleo. Hay que recordar que tenemos que mezclar bien el extracto por inversión. Cuando se haproducido la separación en dos fases, se elimina la capa inferior. Hay que tener cuidado que no que de ningún resto de la fase inferior en la superior, por ello es mejor derramar un poco de la fasesuperior para asegurarse. La parte superior se recoge en un vaso de precipitados que tiene que estar bien seco. Una vez extraída la fase superior se procede a la separación de los pigmentos por medio deuna cromatografía en capa fina. Para ello tomamos una placa de silica gel, en ella señalamos dos marcas, una en la parte inferior a 2 cm. y la superior a 16 cm. de la anterior. Tenemos que tener encuenta al realizar las marcas de no hacerlo con bolígrafo sino que con lápiz y suavemente, para que la tinta no interfiera en la cromatografía con sus pigmentos. Una vez realizadas las marca se pasamosa la aplicación del extracto en la placa. Aplicaremos el extracto en la marca inferior con un microcapilar, haremos 5 o 6 aplicaciones con el capilar. Por último se introduce la placa en una tarro...