Determinación De La Glucosa En Suero
PRÁCTICA N° 5. DETERMINACIÓN DE GLUCOSA EN SUERO
MESA DE PRÁCTICA N° 3
INTEGRANTES: Nº 002 Nº 044 Nº 086 Nº 128 Nº 170 : : : : : Aguilar Vergara, Emily Lindsay CorreaSánchez, Wilson León De La Cruz, Ernesto Ppuño Huaricacha, Sheila Terrel Aedo, Ricardo
CONTENIDO: DETERMINACIÓN DE GLUCOSA EN SUERO INTRODUCCIÓN .........................................................................................................................3 TRABAJO EXPERIMENTAL.......................................................................................................4PROCEDIMIENTO Y ANÁLISIS................................................................................................5 CUESTIONARIO……………………………………………………………………………...…7 BIBLIOGRAFÍA ..........................................................................................................................11
2 Práctica N°5.Determinación de glucosa en suero.
DETERMINACIÓN DE GLUCOSA EN SUEROINTRODUCCIÓN El objetivo de esta práctica es determinar el contenido de glucosa en un preparado empleando para ello un método enzimático espectrofotométrico de tiempo fijo. La glucosa se determina habitualmente en un análisis de sangre (glucemia) o en un análisis de orina (glucosuria). La glucosa es la principal fuente de energía para el metabolismo celular. Se obtiene fundamentalmente a través de laalimentación. El hígado tiene el papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre (glucemia). Para que esos niveles se mantengan y el almacenamiento en el hígado sea adecuado, se precisa la ayuda de la insulina, sustancia producida por el páncreas. Cuando la insulina es insuficiente, la glucosa se acumula en sangre, y si esta situación se mantiene, da lugar a una serie decomplicaciones en distintos órganos. Esta es la razón principal por la que se produce aumento de glucosa en sangre, pero hay otras enfermedades y alteraciones que también la provocan. Por tanto, la determinación de glucosa en sangre (glucemia) es útil para el diagnóstico de numerosas enfermedades metabólicas, como la intolerante a la glucosa y fundamentalmente de la diabetes mellitus. Aunque la glucosapuede determinarse por métodos químicos, estos en su mayoría carecen de especificidad y no pueden distinguir la glucosa de otros monosacáridos. Tanto en análisis clínicos como en la industria alimentaria y farmacéutica se utilizan métodos enzimáticos para la determinación de glucosa. La glucosa oxidasa es una flavoproteína altamente específica que cataliza la oxidación de la glucosa aDgluconolactona, sin que ningún otro azúcar natural reaccione en extensión apreciable. Glucosa oxidasa Ac. Glucónico + H2O2 Peroxidasa Quinonaimina + 4H2O
C6H12O6 + O2C6H10O6 + H2O
2H2O2 + 4AF + Fenol
La Quinonaimina, es un producto coloreado, fue leído a través del espectofotómetro a 510 nm, de acuerdo al siguiente esquema de reacción. Este método, propuesto por Trinder (1) en 1972, será elempleado en esta práctica para la determinación de glucosa en un preparado. A continuación se resumen las distintas reacciones acopladas que se utilizarán para la determinación de la glucosa. La cantidad de colorante generada, y por tanto la absorbancia medida a 510 nm, será directamente proporcional a la cantidad inicial de glucosa en suero. BASE TEÓRICA 1. Estructura y función La sacarosa(azúcar de mesa) es un disacárido de glucosa y fructosa. Se sintetiza en plantas pero no en animales superiores. No contiene ningún átomo de carbono anomérico libre, puesto que los carbonos anoméricos de sus dos unidades monosacáridos constituyentes se hallan unidos entre sí mediante un enlace Oglucosídico. Por esta razón, la sacarosa no es un azúcar reductor y tampoco posee un extremo reductor. La...
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