DILUCIONES

Si se sospecha que una muestra tiene una gran cantidad de microorganismos por mL o gm, la muestra se diluye. Al diluir lamuestra antes de hacer la prueba, se evita que las placastengan exceso de colonias, permitiendo obtener diluciones con un número de colonias entre 25 y 250 CFU/ml o gm. El plan de dilución que más frecuentemente se utiliza envuelve diluir la muestra por unfactor de 10. La muestra se diluye con una solución salina estéril, 0.85% NaCl of 0.1% peptona. Usualmente en este laboratorio se utilizan botellas de dilución con un volumen de 90 ó 99 ml.

1. Lamuestra ya sea sólida o líquida se considera que tiene un factor de dilución de 100 ó 1 (no-diluída).
2. Si el diluyente tiene 90 ml de solución estéril, para hacer una dilución 1/10, transfiera10 ml ó 10 gm al blanco. Esta es la dilución 10-1.
3. Continue haciendo las diluciones necesarias.

Para diluciones utilizando un volumen de 99 ml de diluyente, puede añadir 11 ml para hacersolución de 10-1 ó 1 ml para hacer dilución 10-2.

El mismo procedimiento aplica al poner la muestra en placa. Si se toma 1 ml de muestra del la dilución 10-3 y se añade agar, tienes la misma diluciónen la placa que tienes en el tubo. Si transfieres 0.1 ml de la muestra de la botella de dilución y le viertes agar, has procedido a hacer una próxima dilución (0.1 ml de la dilución 10-3 en la placase convierte en la dilución 10-4).

REPORTE DE RESULTADOS

Cuando se contabilizan las placas, es importante seguir las siguientes reglas. Debes incluir:

• Dos cifras significativas
•Factor de dilución
• CFU / ml ó CFU / gm
• Contaje estándar de placa (SPC) ó contaje estimado estándar de placa (ESPC)

SOLO SE REPORTA UN CONTAJE POR MUESTRA, NO POR DILUCION.

Cuandose calculan los resultador de placas en duplicado se reporta la media geométrica (promedio). En la práctica, se utiliza el promedio para reducir estadísticamente las muestras que se salen del... [continua]

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