discurso

PRÁCTICA Nº 6

OBJETIVO
Evaluar el método de degradación química de los ácidos nucleicos.

DEGRADACIÓN Y SÍNTESIS DE ÁCIDOS NUCLEICOS


MARCO TEÓRICO

In Vivo, las síntesis y degradaciónde los ácidos nucleicos constituye su metabolismo. In vitro se degradan y sintetizan ácidos nucleicos controladamente con el fin de purificar o manipular determinadas clases de moléculas que seutilizarán como base en experimentos complejos de Ingeniería genética.
La degradación de los ácidos nucleicos puede ser química o enzimática. La degradación química de los ácidos nucleicos se produce a pHmuy bajos, produciendo la rotura de los grupos fosfodiéster, rompiéndose los enlaces N-glucosílicos entre las bases y azúcares, este tipo de degradación se utiliza cuando se quiere determinar lacomposición de la bases de un ácido nucleico.
A pH 4 aproximadamente se produce una depurinización, afectando más a la molécula del ADN que a la ARN. A pH neutro se invierte la tendencia y el ADN se haceunas 200 veces más resistente a la hidrólisis que el ARN; a pH aún más alto el ADN es prácticamente resistente a la hidrólisis, pero no así el ARN que a pH 11 y 37 ºC se hidroliza totalmente en pocosminutos a una mezcla de nucleótidos 3’ y 2’.
También existe la degradación enzimática mediante enzimas denominas nucleasas si actúan a partir de los extremos (exonucleasas) o dentro de la cadena(endonucleasas).
El proceso inverso denominado Síntesis se realiza a partir de la enzima denominada ADN polimerasa, esta permite sintetizar el ADN in vivo como in vitro.

ACTIVIDADES
MaterialesHígado de pollo
Probeta
Varilla de vidrio
Alcohol de 96
Mortero
Cloruro sódico 2M
Vasos de precipitado
SDS al 10%
Pipeta
Arena
Portaobjeto
Trocito de gasa para filtrar

Obtenciónde ADN (método simple)

1. Triturar medio hígado de pollo en un mortero. Añadir arena para que al triturar se puedan romper las membranas de y queden los núcleos sueltos.
2. Añadir al...