Ecología De Los Microorganismos Patogenos

Durante la semana de duración de las prácticas, se desarrollaron las técnicas más empleadas en un laboratorio en relación con la presencia de microorganismos en el ambiente.
1º MICROBIOLOGÍA DEL AIRE:
Consiste en la determinación de la calidad microbiológica del aire de una estancia (habitación, local, cámara frigorífica, salida de aire…). Suele investigarse la presencia de bacteriasaerófilas mesófilas y de mohos y levaduras, empleando para ello medios de cultivo adecuados. El control ambiental puede realizarse mediante la técnica de sedimentación y mediante un muestreador de aire.
1.1) SEDIMENTACIÓN:

* Material: placas de Petri con medios de cultivo estériles de Agar Triptosa (determinación de bacterias aerobias mesófilas) y Agar Sabouraud (determinación de mohos ylevaduras).

* Método: es una técnica cualitativa, sencilla y eficaz que consiste en dejar una placa de Petri destapada con el medio de cultivo expuesto al ambiente durante 15/30 minutos, en determinados puntos que se consideren críticos en la estancia a muestrear. Pasado el tiempo de exposición, se tapa la placa y se lleva a incubación a 37°C durante 48 horas en el caso de la determinación debacterias y 25/28°C 72 horas en el caso de mohos y levaduras.

* Resultados:

Tras las 48 horas en Agar Triptosa se han formado 4 colonias:

Colonia 1: macroscópicamente redondeada, blanquecina, con bordes algodonosos. Microscópicamente se visualiza mediante tinción: GRAM +, cocos, y estreptococos.
Colonia 2: macroscópicamente presenta una forma irregular, es blanquecina, con bordes netos.Microscópicamente resultan GRAM +, cocos sin apenas asociaciones.
Colonia 3: macroscópicamente con forma redonda, blanquecina, bordes netos. Microscópicamente GRAM +, cocos sin asociaciones.
Colonia 4: macroscópicamente presenta una forma irregular, un color ligeramente amarillo. Microscópicamente resultan ser GRAM +, Staphylococos.

Tras las 72 horas en Agar Sabouraud se han formado 2colonias:

Ambas colonias, macroscópicamente son redondeadas, poco desarrolladas, blancas, algodonosas, convexas, una de ellas con bordes ligeramente translúcidos. Para observar al microscopio realizamos la técnica de la cinta adhesiva y la gota de azul de lactofenol sobre un porta, y al estudio presentan hifas septadas con conidióforos. Parecen ser Aspergillus fumigatus.

En el caso de algunoscompañeros se evidenció la presencia de Microsporum gallinarum y Penicillium.

1.2) MUESTREADOR DE AIRE:

* Material: muestreador de aire (sistema SAS). Al igual que en el caso de la Sedimentación utilizaremos como medios: Agar Triptosa para bacterias y Sabouraud para mohos y levaduras.

* Método: los muestreadores de aire son aparatos de reducido tamaño y manejables que mediante elsistema SAS aspiran un determinado volumen de aire por unidad de tiempo que se proyecta por impacto sobre el medio de cultivo deseado, de tal forma que los microorganismos aspirados se depositan sobre el mismo. Haremos pasar el aire durante 2 minutos a través de cada placa. Incubaremos a 37°C 48h la placa de A. Triptosa para bacterias y a 28°C, 72h la placa de A. Sabouraud para mohos y levaduras.* Resultados:

Tras las 48 horas en Agar Triptosa han crecido 6 colonias de apariencia irregular. Aplicamos la fórmula para determinar el número de unidades formadoras de colonias:

NºUFC/m3= N x 1000/20 x NU

Donde N= número de colonias, 20= flujo de aire aspirado por litro, NU= unidades de tiempo (en este caso 2 minutos).
Tras aplicar la fórmula obtenemos 150 UFC/m3.
También esimportante hacer la media con los resultados de los compañeros para tener una vista global de la carga bacteriana del laboratorio. El resultado es 226, 875 UFC/m3.

Tras las 72 horas en Agar Sabouraud han crecido dos colonias:

Colonia 1: redonda, blanca, convexa, con septos.
Colonia 2: oscura en su centro, translúcida en bordes (demasiado joven para visualizar órganos reproductores).
Al...