Efecto de los inhibidores enla velocidad de reaccion enzimaticay efecto de laconcentracion del sustrato sobre la velocidad de reaccion.

Introducción
si se mantiene la concentración de la enzima constante y variamos la concentración de substrato se obtiene una curva hiperbólica. Al principio un aumento de la concentración de substrato produce un aumento rápido de la velocidad de reacción, pero si se sigue aumentando la concentración de substrato, la velocidad de reacción comienza a disminuir; vemos que a muy altasconcentraciones de substrato se observa que no cambia la velocidad de reacción, se dice que los centros activos de la enzima se encuentran saturados. La velocidad de reacción que se obtiene a esa alta concentración de substrato se define como la velocidad máxima (vm) de la reacción enzimática bajo las condiciones especificadas. La concentración de substrato [S], a la semivelocidad máxima de reacción (½ v ) sepuede determinar de la figura y representa la constante de Michaelis o km, la cual es una característica para cada enzima. La inversa de km, o 1/ km, mide aproximadamente la afinidad de la enzima por el substrato. Mientras más pequeño sea el valor de km, mayor será la afinidad de la enzima por el substrato. Si varias enzimas compiten en el metabolismo por el mismo substrato, éste serátransformado preferentemente por la enzima con mayor afinidad.
Así tendremos: 
    (simplificando)   
Si reordenamos la ecuación tendremos que: [S] + km = 2 [S] (despejamos) km = [S]
Esto significa que la concentración del sustrato necesaria para alcanzar la mitad de la velocidad es el valor de km de la enzima.
La expresión de Michelis – Menten puede ser transformada algebraicamente en otras formas,que son más útiles para la expresión de los datos experimentales. Una de esas formas consiste en tomar los recíprocos (inversa) de ambos miembros de la ecuación.

Esta expresión conocida con el nombre de ecuación Lineweaver – Burk, corresponde a una recta de ecuación :
y = a.m + b

Midiendo las velocidades para distintas concentraciones de sustrato y representando gráficamente (al lado)obtendremos una gráfica del tipo lineal.

Objetivo
Comprobar el efecto de la concentración del sustrato sobre la velocidad de reacción enzimática.
Determinar la constante de Michaelis-Menten por los metodos conocidos, asi como su aplicación.
Resultado
tubos | T | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
Absorvancia | 0 | 0.177 | 0.219 | .366 | 0.020 | 0.548 | 0.961 | 0.479 | 0.501 |
AzucarreductorMmoles7 3.5 ml | 0 | 1.9 | 2.3 | 4.1 | ---- | 6.3 | 10.6 | 5.5 | 6.6 |
Velocidad en unidades de invertasa | 0 | .19 | 0.23 | 0.41 | ---- | 0.63 | 1.06 | 0.55 | 0.66 |
Concentración del sustrato | 0 | 1 | 2.5 | 3.5 | ---- | 10 | 15 | 20 | 25 |

tubos | t | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 |
1/vo | 0 | 5.2631 | 4.3478 | 2.439 | 0 | 1.5873 | .9433 | 1.8181 | 1.5151 |
1/[s] | 0 | 1 | .4 |.28 | .2 | .1 | .06 | .05 | .04 |

Discusión:
Al tomar las lecturas de absorvancia en el espectrofotómetro en el tubo 4 nos dio una lectura negativa esto se debe a q como es un proceso en serie pudo a ver faltado el sustrato por lo cual no hubo trabajo de la enzima.
Por lo tanto decidimos no usar esa lectura para no alterar la grafica.
Las reacciones catalizadas por enzimas son saturables,la velocidad de catálisis no muestra un comportamiento lineal en una gráfica al aumentar la concentración de sustrato. Si la velocidad inicial de la reacción se mide a una determinada concentración de sustrato [S], la velocidad de la reacción (V) aumenta linealmente con el aumento de la [S]. Sin embargo, cuando aumentamos la [S], la enzima se satura de sustrato y alcanza su velocidad máxima(Vmax), que no sobrepasará en ningún caso, independientemente de la [S].

Conclusión
Si se mantiene la concentración de la enzima constante y variamos la concentración de substrato se obtiene una curva hiperbólica como la de la figura (arriba izquierda). Al principio un aumento de la concentración de substrato produce un aumento rápido de la velocidad de reacción, pero si se sigue aumentando la...